P16（INK4A）は、乳房間質線維芽細胞のパラクリン腫瘍促進効果を抑制します

がん関連線維芽細胞（CAF）は、乳がん関連間質の中で最も豊富で、おそらく最も活性な細胞成分であり、パラクリン効果を通じて発がんを促進します。しかし、その分子基盤は依然として解明されていない。我々はここで、同じ患者から単離された正常な隣接する癌のない組織と比較して、83% CAF で p16(INK4A) 発現が減少していることを示しました。この減少は主に、CAF における AUF1 依存性の CDKN2A mRNA の代謝回転の増加によるものです。重要なことに、特定の siRNA を使用した p16(INK4A) の下方制御は乳房線維芽細胞を活性化し、間質細胞由来因子 1 (SDF-1) およびマトリックスメタロプロテイナーゼ (MMP)-2 の発現/分泌レベルを増加させました。その結果、これらの細胞で馴化した培地は上皮細胞の増殖を刺激しました。さらに、乳がん細胞の遊走/浸潤もSDF-1依存的に増強されました。この効果は、上皮間葉遷移状態の誘導によって媒介されました。対照的に、異所性発現またはAUF1の下方制御によるp16(INK4A)レベルの増加は、SDF-1およびMMP-2の分泌レベルを低下させ、CAFの発がん促進効果を抑制した。さらに、p16(INK4A) 欠損線維芽細胞は、マウスにおける乳房腫瘍異種移植片の形成と増殖速度を加速しました。重要なことに、p16(INK4A)欠損線維芽細胞の存在下で形成された腫瘍は、より高いレベルの活性Akt、Cox-2、MMP-2およびMMP-9を示し、p16(INK4A)の存在下で形成された異種移植片と比較して、より高い攻撃性を示した。)-熟練した線維芽細胞。これらの結果は、乳房間質線維芽細胞における p16(INK4A) の下方制御がその活性化への重要なステップであることを初めて示しています。

Cancer-associated fibroblasts (CAFs), the most abundant and probably the most active cellular component of breast cancer-associated stroma, promote carcinogenesis through paracrine effects; however, the molecular basis remains elusive. We have shown here that p16(INK4A) expression is reduced in 83% CAFs as compared with their normal adjacent counterparts cancer-free tissues isolated from the same patients. This decrease is mainly due to AUF1-dependent higher turnover of the CDKN2A mRNA in CAFs. Importantly, p16(INK4A) downregulation using specific siRNA activated breast fibroblasts and increased the expression/secretion levels of stromal cell-derived factor 1 (SDF-1) and matrix metalloproteinase (MMP)-2. Consequently, media conditioned with these cells stimulated the proliferation of epithelial cells. Furthermore, the migration/invasion of breast cancer cells was also enhanced in an SDF-1-dependent manner. This effect was mediated through inducing an epithelial-mesenchymal transition state. By contrast, increase in p16(INK4A) level through ectopic expression or AUF1 downregulation, reduced the secreted levels of SDF-1 and MMP-2 and suppressed the pro-carcinogenic effects of CAFs. In addition, p16(INK4A)-defective fibroblasts accelerated breast tumor xenograft formation and growth rate in mice. Importantly, tumors formed in the presence of p16(INK4A)-defective fibroblasts exhibited higher levels of active Akt, Cox-2, MMP-2 and MMP-9, showing their greater aggressiveness as compared with xenografts formed in the presence of p16(INK4A)-proficient fibroblasts. These results provide the first indication that p16(INK4A) downregulation in breast stromal fibroblasts is an important step toward their activation.