多重RT-PCRを使用した慢性骨髄性白血病患者におけるBCR/ABLバリアントの包括的な分析

背景：特定の染色体異常であるフィラデルフィア染色体（PH）は、慢性骨髄性白血病（CML）患者の90〜95％に存在します。この異常は、染色体9と22の間の相互転座に起因し、BCR/ABL融合遺伝子を作成します。CMLの診断は、BCR/ABL遺伝子またはpH染色体の検出に基づいています。異なるサイズの融合タンパク質は、BCR遺伝子のブレークポイントに応じてエンコードされます。一般に、BCR遺伝子の3つのブレークポイントクラスター領域が記載されています：メジャー（M-BCR）、マイナー（M-BCR）、およびマイクロ（Micro-BCR）。この研究の目的は、マルチプレックス逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）を使用して、チュニジア患者60人のBCR/ABL融合遺伝子を検索し、従来の細胞遺伝学の結果と結果を比較することでした。 方法：診断時に得られた60人の患者から得られた骨髄（BM）または末梢血（PB）サンプルは、マルチプレックスRT-PCRおよび従来の細胞遺伝学によって分析されました。 結果：検査された45人の患者は、ある種のBCR/ABLの再配置に対して陽性でした。患者の大半（97.77％）は、P210 BCR-ABL転写産物の1つ（B3A2で63％、B2A2で36％）を発現しましたが、まれなE19A2転写産物を示しました。 結論：Multiplex RT-PCRは、典型的で非定型のBCR/ABL転写産物の検出を改善するための高速で信頼できる手法です。

BACKGROUND: A specific chromosomal abnormality, the Philadelphia chromosome (Ph), is present in 90 - 95% of patients with chronic myeloid leukemia (CML). This aberration results from a reciprocal translocation between chromosomes 9 and 22, creating a BCR/ABL fusion gene. The diagnosis of CML is based on the detection of BCR/ABL gene or Ph chromosome. Fusion proteins with different sizes are encoded depending on the breakpoint in the BCR gene. In general, 3 breakpoint cluster regions in the BCR gene have been described: major (M-bcr), minor (m-bcr), and micro (micro-bcr). The aim of this study was to search the BCR/ABL fusion gene in 60 Tunisian patients using multiplex reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and compare our results with those of conventional cytogenetics. METHODS: Bone marrow (BM) or peripheral blood (PB) samples, obtained at diagnosis, from 60 patients were analyzed by multiplex RT-PCR and conventional cytogenetics. RESULTS: 45 patients examined were positive for some type of BCR/ABL rearrangement. The majority of the patients (97.77%) expressed one of the p210 BCR-ABL transcripts (63% with b3a2 and 36% with b2a2) while only one patient showed a rare e19a2 transcript. CONCLUSIONS: Multiplex RT-PCR is a fast and reliable technique for improved detection of typical and atypical BCR/ABL transcripts.