アデノウイルスタイプ3ヘキソン内の中和エピトープの取り込みを伴うエンテロウイルスに対する保護71

Enterovirus 71（EV71）は、子供の間で高い死亡率を持つ手、足と口の病気の原因です。EV71のさまざまな中和B細胞エピトープが、潜在的なワクチン候補として特定されています。抗原のアデノウイルス（AD）へのカプシド編成は、新しいワクチンアプローチのために開発されました。AD3ベースのEV71ワクチンベクターを構築しました。AD3EGFPのカプシドタンパク質ヘクソン内の異なる表面露出ドメイン内で、EV71のカプシドタンパク質VP1に由来する15のアミノ酸を含む中和エピトープSP70を組み込んで、再生剤アデノビロスタイプ3（Ad3）を発現しているエンゲロドエンゲローメントを発現するADENOVIRUS 3（緑色蛍光タンパク質。熱安定性と成長速度論的アッセイは、ヘキソンの過可視領域（HVR1、HVR2、またはHVR7）へのSP70エピトープの取り込みが広告フィットネスに影響しないことを示唆しました。SP70エピトープは、すべてのヘキソン修飾された無傷のビリオン表面に露出していると考えられていました。BALB/Cマウスを繰り返し投与して修正されたADSで投与すると、抗SP70体液免疫応答が高まりました。重要なことに、母マウスの修正されたADS予防接種は、致死的なEV71チャレンジに対する新生児マウスへのin vivoの保護を付与し、修正されたADS免疫マウス血清は、新生児の致死課題に対する受動的保護も付与しました。組換えGST融合SP70タンパク質免疫と比較して、HVR1またはHVR2のSP70を含むADSによる免疫は、より高いSP70特異的IgG力価、より高い中和力価、および新生児マウスに対してより効果的な保護を授与しました。したがって、この研究は、ヘキソン修飾AD3ベクター開発のための貴重な情報を、有望なEV71ワクチン候補として、および他の病原体のエピトープ誘導媒体として提供します。

Enterovirus 71 (EV71) is responsible for hand, foot and mouth disease with high mortality among children. Various neutralizing B cell epitopes of EV71 have been identified as potential vaccine candidates. Capsid-incorporation of antigens into adenovirus (Ad) has been developed for a novel vaccine approach. We constructed Ad3-based EV71 vaccine vectors by incorporating a neutralizing epitope SP70 containing 15 amino acids derived from capsid protein VP1 of EV71 within the different surface-exposed domains of the capsid protein hexon of Ad3EGFP, a recombinant adenovirus type 3 (Ad3) expressing enhanced green fluorescence protein. Thermostability and growth kinetic assays suggested that the SP70 epitope incorporation into hypervariable region (HVR1, HVR2, or HVR7) of the hexon did not affect Ad fitness. The SP70 epitopes were thought to be exposed on all hexon-modified intact virion surfaces. Repeated administration of BALB/c mice with the modified Ads resulted in boosting of the anti-SP70 humoral immune response. Importantly, the modified Ads immunization of mother mice conferred protection in vivo to neonatal mice against the lethal EV71 challenge, and the modified Ads-immunized mice serum also conferred passive protection against the lethal challenge in newborn mice. Compared with the recombinant GST-fused SP70 protein immunization, immunization with the Ads containing SP70 in HVR1 or HVR2 elicited higher SP70-specific IgG titers, higher neutralization titers, and conferred more effective protection to neonatal mice. Thus, this study provides valuable information for hexon-modified Ad3 vector development as a promising EV71 vaccine candidate and as an epitope-delivering vehicle for other pathogens.