発癌性BRAF（V600E）は、黒色腫におけるインターロイキン-1の誘導を介して間質細胞媒介免疫抑制を促進します

目的：この研究では、原発性ヒト黒色腫腫瘍関連線維芽細胞（TAF）による免疫抑制の下流誘導を分析することに加えて、黒色腫における免疫調節遺伝子の発現を調節する際のBRAF（V600E）シグナル伝達の特定の役割を評価しました。 実験設計：原発性ヒトメラニン細胞とメラノーマ細胞株を導入して、WTまたはV600E型のBRAFを発現し、その後遺伝子発現分析を行いました。BRAF（V600E）阻害剤Vemurafenibを使用して、BRAF（V600E）陽性メラノーマ細胞株および阻害剤治療を受けているメラノーマ患者の腫瘍の標的を確認しました。黒色腫患者生検から生成されたTAF系統は、BRAF（V600E）免疫調節因子による治療前後の腫瘍抗原特異的T細胞の機能を阻害する能力についてテストされました。処理されたTAFの転写分析を実施して、T細胞抑制の潜在的なメディエーターを特定しました。 結果：BRAF（V600E）の発現は、メラニン細胞およびメラニョーマ細胞株におけるインターロイキン1アルファ（IL-1α）およびIL-1βの転写を誘導しました。さらに、ベムラフェニブは、阻害剤治療を受けている12人のメラノーマ患者のうち11人のメラノーマ細胞株、そして最も顕著なヒト腫瘍生検でのIL-1タンパク質の発現を減少させました。IL-1α/βを伴う黒色腫患者由来TAFSの治療により、メラノーマ特異的細胞毒性T細胞の増殖と機能を抑制する能力が大幅に向上し、この阻害は、COX-2およびPD-1リガンドPD-L1のIL-1およびPD-L2のIL-1およびPD-L2によるアップレギュレーションに一部起因していました。 結論：この研究は、BRAF（V600E）阻害に敏感な免疫抑制の新しいメカニズムを明らかにし、IL-1の臨床遮断がBRAF野生型腫瘍の患者に利益をもたらし、免疫療法介入と潜在的に相乗的になる可能性があることを示しています。

PURPOSE: In this study, we assessed the specific role of BRAF(V600E) signaling in modulating the expression of immune regulatory genes in melanoma, in addition to analyzing downstream induction of immune suppression by primary human melanoma tumor-associated fibroblasts (TAF). EXPERIMENTAL DESIGN: Primary human melanocytes and melanoma cell lines were transduced to express WT or V600E forms of BRAF, followed by gene expression analysis. The BRAF(V600E) inhibitor vemurafenib was used to confirm targets in BRAF(V600E)-positive melanoma cell lines and in tumors from melanoma patients undergoing inhibitor treatment. TAF lines generated from melanoma patient biopsies were tested for their ability to inhibit the function of tumor antigen-specific T cells, before and following treatment with BRAF(V600E)-upregulated immune modulators. Transcriptional analysis of treated TAFs was conducted to identify potential mediators of T-cell suppression. RESULTS: Expression of BRAF(V600E) induced transcription of interleukin 1 alpha (IL-1α) and IL-1β in melanocytes and melanoma cell lines. Further, vemurafenib reduced the expression of IL-1 protein in melanoma cell lines and most notably in human tumor biopsies from 11 of 12 melanoma patients undergoing inhibitor treatment. Treatment of melanoma-patient-derived TAFs with IL-1α/β significantly enhanced their ability to suppress the proliferation and function of melanoma-specific cytotoxic T cells, and this inhibition was partially attributable to upregulation by IL-1 of COX-2 and the PD-1 ligands PD-L1 and PD-L2 in TAFs. CONCLUSIONS: This study reveals a novel mechanism of immune suppression sensitive to BRAF(V600E) inhibition, and indicates that clinical blockade of IL-1 may benefit patients with BRAF wild-type tumors and potentially synergize with immunotherapeutic interventions.