ALS脊髄運動ニューロンにおけるRNA結合タンパク質の凝集：一般的な病原性メカニズムの証拠

筋萎縮性側索硬化症（ALS）の病因は明らかに描写されていないが、RNA代謝の変化が疾患のいくつかの既知の遺伝的変異体の共通性であるという証拠が増えている。この研究では、C9ORF72（C9ORF72（GGGGGCC）-ALS; n = 5）、SOD1（MTSOD1-ALS; n = 9）の変異を有するALS患者における脊髄運動ニューロン（MNS）における10のALS関連タンパク質の発現を評価しました。）、fus/tls（mtfus/tls-als; n = 2）、またはtardbp（mttdp-43-als; n = 2）は、これらを散発性ALS（sals; n = 4）および既知の既知のない家族のALSの症例と対比しました。突然変異（fals; n = 2）。TDP-43、FUS/TLS、SOD1、C9ORF72、ユビキチン、隔離1（P62）、オプトインリン、リン酸化高分子量神経増殖、ペリプヘリン、およびRho-Guaninine nucileotide（RGNEF FATOR（RGNEF）に対する抗体を使用して、カリメトリック免疫組織化学（IHC）を実施しました。。RGNEF-Immunoreactive Neuronal Cytoplasmic Inclusions（NCIS）は、脊髄MN内のTDP-43、FUS/TLS、およびP62と共局在することが観察されました。免疫沈降により相互作用する能力を確認しました。また、MTSOD1-ALSの症例には、C9ORF72-免疫反応性拡散NCIの存在を含む独自のIHCシグネチャがあることも発見しました。これらの発見は、RNA代謝の変化がALSのコア病原性経路であるという仮説を支持しています。また、脊髄MNのルーチンIHCベースの分析は、以前にSOD1変異を抱えていなかった家族の特定を支援する可能性があると結論付けています。

While the pathogenesis of amyotrophic lateral sclerosis (ALS) remains to be clearly delineated, there is mounting evidence that altered RNA metabolism is a commonality amongst several of the known genetic variants of the disease. In this study, we evaluated the expression of 10 ALS-associated proteins in spinal motor neurons (MNs) in ALS patients with mutations in C9orf72 (C9orf72(GGGGCC)-ALS; n = 5), SOD1 (mtSOD1-ALS; n = 9), FUS/TLS (mtFUS/TLS-ALS; n = 2), or TARDBP (mtTDP-43-ALS; n = 2) and contrasted these to cases of sporadic ALS (sALS; n = 4) and familial ALS without known mutations (fALS; n = 2). We performed colorimetric immunohistochemistry (IHC) using antibodies against TDP-43, FUS/TLS, SOD1, C9orf72, ubiquitin, sequestosome 1 (p62), optineurin, phosphorylated high molecular weight neurofilament, peripherin, and Rho-guanine nucleotide exchange factor (RGNEF). We observed that RGNEF-immunoreactive neuronal cytoplasmic inclusions (NCIs) can co-localize with TDP-43, FUS/TLS and p62 within spinal MNs. We confirmed their capacity to interact by co-immunoprecipitations. We also found that mtSOD1-ALS cases possess a unique IHC signature, including the presence of C9orf72-immunoreactive diffuse NCIs, which allows them to be distinguished from other variants of ALS at the level of light microscopy. These findings support the hypothesis that alterations in RNA metabolism are a core pathogenic pathway in ALS. We also conclude that routine IHC-based analysis of spinal MNs may aid in the identification of families not previously suspected to harbor SOD1 mutations.