CWC22は、前mRNAスプライシングおよびエクソンジャンクションコンプレックスアセンブリを接続します

エクソンジャンクション複合体（EJC）は、転写後mRNAの運命の重要な調節因子であり、スプライシング中にmRNAに結合します。EJCの組成はよく理解されていますが、スプライシング依存のEJCアセンブリとEJCを募集する因子を媒介するメカニズムはとらえどころのないままです。ここでは、CWC22をEJCアセンブリに必要な本質的なスプライシング係数として特定します。CWC22枯渇細胞では、pre-mRNAスプライシングは損なわれますが、CWC22の中心断片によって救助されます。CWC22のMIF4Gドメインは、EJCコアタンパク質EIF4A3との直接的な相互作用を介してEJCアセンブリを開始することを示し、CWC22への結合を廃止するEIF4A3の変異を特徴付けます。これらのeIF4A3変異体は、スプライシングに依存しない組換えEJCコア複合体を効率的に核形成しますが、スプライシング依存のEJC堆積をサポートできません。私たちの研究は、スプライシング機械とEJCの間に直接的なリンクを確立するため、転写後遺伝子調節ネットワークの中心での分子相互作用を明らかにします。

The exon junction complex (EJC) is a key regulator of posttranscriptional mRNA fate and binds to mRNA during splicing. Although the composition of EJCs is well understood, the mechanism mediating splicing-dependent EJC assembly and the factor(s) recruiting the EJC remain elusive. Here, we identify CWC22 as an essential splicing factor that is required for EJC assembly. In CWC22-depleted cells, pre-mRNA splicing is impaired but is rescued by a central fragment of CWC22. We show that the MIF4G domain of CWC22 initiates EJC assembly via a direct interaction with the EJC core protein eIF4A3, and we characterize mutations in eIF4A3 that abolish binding to CWC22. These eIF4A3 mutants efficiently nucleate splicing-independent recombinant EJC core complexes, but they fail to support splicing-dependent EJC deposition. Our work establishes a direct link between the splicing machinery and the EJC, hence uncovering a molecular interaction at the center of a posttranscriptional gene regulation network.