原発性ブタ膀胱膀胱上皮細胞およびヒト尿路皮細胞株5637におけるp-アミノベンゾ酸とp-フェニレンジアミンのN-アセチル化5637

n-アセチルトランスフェラーゼ（NAT）は、N-アセチル化がN-ヒドロキシル化を介して生体活性化を減少または防止するため、特定の発がん性アリールアミンの代謝における重要な酵素です。膀胱でそのようなプロセスを研究するには、細胞培養モデルを使用することができますが、代謝能力を特徴付ける必要があります。この研究は、酵素NAT1の2つのよく知られている基質であるP-アミノベンゾ酸（PABA）と毛染料前駆体Pフェニレンジアミン（PPD）を使用して、2つの尿路皮細胞系のN-アセチル化能力に焦点を当てました。構成的NAT1活性は、ブタ膀胱膀胱上皮細胞（PUBEC）の初代培養を使用して調査し、ヒト尿路上皮細胞株5637で、PABAおよびPPD誘発毒性に関するさらなるin vitro研究に対する適合性を評価しました。PABAおよびPPDのN-アセチル化は、さまざまな基質レベルと最大60分間インキュベーションすると、2つの細胞系のサイトゾルにおける高性能液体クロマトグラフィー（HPLC）分析によって決定されました。一次PUBECは、アセチル化代謝物へのPABA変換とモノセチル化PPDの形成の両方に基づいて、5637細胞株と比較して、より高いN-アセチル化速度（PABAの場合は2.5倍、PPDで5倍）を明らかにしました。したがって、尿路皮細胞系は、NAT1を介した芳香族アミンのN-アセチル化に関するさらなる研究のためのツールとして有用かもしれません。

N-Acetyltransferases (NAT) are important enzymes in the metabolism of certain carcinogenic arylamines, as N-acetylation decreases or prevents their bioactivation via N-hydroxylation. To study such processes in the bladder, cell culture models may be used, but metabolic competence needs to be characterized. This study focused on the N-acetylation capacity of two urothelial cell systems, using p-aminobenzoic acid (PABA) and the hair dye precursor p-phenylenediamine (PPD), two well-known substrates of the enzyme NAT1. The constitutive NAT1 activity was investigated using primary cultures of porcine urinary bladder epithelial cells (PUBEC) and in the human urothelial cell line 5637 to assess their suitability for further in vitro studies on PABA and PPD-induced toxicity. N-Acetylation of PABA and PPD was determined by high-performance liquid chromatography (HPLC) analysis in cytosols of the two cell systems upon incubation with various substrate levels for up to 60 min. The primary PUBEC revealed higher N-acetylation rates (2.5-fold for PABA, 5-fold for PPD) compared to the 5637 cell line, based on both PABA conversion to its acetylated metabolite and formation of mono- and diacetylated PPD. The urothelial cell systems may thus be useful as a tool for further studies on the N-acetylation of aromatic amines via NAT1.