マウスの発情サイクルステージングの識別のための膣洗浄、クリスタルバイオレット染色、および膣細胞学的評価の実行

げっ歯類の生殖状態を評価する迅速な手段は、生殖機能障害の研究においてだけでなく、病気の新しいマウスモデルの生産や、病理学的課題に続く組織変性（または再生）のホルモン調節の調査にも必要です。マウスの生殖（または発情）サイクルは、侵害、発情、発情、および発情の4つの段階に分けられます。卵巣ステロイド17-β-エストラジオールとプロゲステロンの循環レベル、ゴナドトロピンの黄体化および卵胞刺激ホルモン、およびこれらの生殖段階を介したリュートトロピックホルモンプロラクチンシグナル移行の定義された変動。マウス膣管内の細胞類型の変化は、これらの根底にある内分泌イベントを反映しています。核塗抹標本に存在する核形成上皮細胞、角質扁平上皮細胞、および白血球の相対比の毎日の評価を使用して、マウスの発情期を特定できます。ただし、これらのサンプルの収集に使用される侵襲性の程度は、生殖状態を変化させ、塗抹標本の細胞学的評価を混乱させる可能性のある炎症反応を引き出すことができます。ここでは、生殖サイクルを変更せずに雌マウスの発情サイクルの段階を決定するために使用できる、単純で非侵襲的なプロトコルについて説明します。膣スミアの主要な細胞類型学の収集と分析により、発情サイクルの4つの段階を区別する方法を詳しく説明し、これらの変化を内分泌状態に関してどのように解釈できるかを示します。

A rapid means of assessing reproductive status in rodents is useful not only in the study of reproductive dysfunction but is also required for the production of new mouse models of disease and investigations into the hormonal regulation of tissue degeneration (or regeneration) following pathological challenge. The murine reproductive (or estrous) cycle is divided into 4 stages: proestrus, estrus, metestrus, and diestrus. Defined fluctuations in circulating levels of the ovarian steroids 17-β-estradiol and progesterone, the gonadotropins luteinizing and follicle stimulating hormones, and the luteotropic hormone prolactin signal transition through these reproductive stages. Changes in cell typology within the murine vaginal canal reflect these underlying endocrine events. Daily assessment of the relative ratio of nucleated epithelial cells, cornified squamous epithelial cells, and leukocytes present in vaginal smears can be used to identify murine estrous stages. The degree of invasiveness, however, employed in collecting these samples can alter reproductive status and elicit an inflammatory response that can confound cytological assessment of smears. Here, we describe a simple, non-invasive protocol that can be used to determine the stage of the estrous cycle of a female mouse without altering her reproductive cycle. We detail how to differentiate between the four stages of the estrous cycle by collection and analysis of predominant cell typology in vaginal smears and we show how these changes can be interpreted with respect to endocrine status.