アミロイド様フィブリル形成および細胞活性のための線維形成ラミニン由来ペプチドA119（Lsnidyilikas）の構造的要件

マウスラミニンα1鎖配列（残基1321-1332）に由来するA119ペプチド（Lsnidyilikas）は、細胞付着、神経突起の伸長、およびアミロイド様フィブリル形成を促進します。この研究では、生物学的活性とアミロイド様フィブリル形成のためのA119の構造要件を評価しました。A119への細胞の付着はヘパリンによって阻害され、シンデカンおよびグリピカン過剰発現細胞を使用して、A119がシンデカンに特異的に結合することが判断されました。また、アラニン置換ペプチドのセットを使用して、A119活性の重要な残基を評価しました。細胞付着活性は、Leu（1） - 、Ser（2） - 、Asn（3） - 、Ile（4） - 、Ile（7） - 、Ile（9） - 、およびLys（10））標準的なアラニンペプチドで大幅に減少しました。残基ILE（4）、ILE（7）、ILE（9）、およびLys（10）は、神経突起の伸長活性にとって重要でした。コンゴ赤染色と電子顕微鏡検査により、A119のILE（4）、ILE（7）、ILE（9）、およびSer（12）がアミロイド様フィブリル形成に必要であることが明らかになりました。これらのデータは、ILE残基がA119のアミロイド様フィブリル形成、細胞付着、および神経突起伸長活性に重要であることを示唆しています。さらに、A119のエナンチオマーは、同様のアミロイド様フィブリル形成と、細胞付着およびFAKシグナル伝達のレベルの増加を示しました。これらの発見は、アミロイド様フィブリル形成のメカニズムに光を当て、アミロイド様フィブリルと細胞の挙動を形成する能力との関係を示しています。

A119 peptide (LSNIDYILIKAS), derived from the mouse laminin α1 chain sequence (residues 1321-1332), promotes cell attachment, neurite outgrowth, and amyloid-like fibril formation. In this study, we evaluated the structural requirements of A119 for biological activities and amyloid-like fibril formation. The attachment of the cell to A119 was inhibited by heparin, and using syndecan- and glypican-overexpressed cells, it was determined that A119 specifically binds to syndecans. We also evaluated the critical residues for A119 activities using a set of alanine-substituted peptides. Cell attachment activity was significantly reduced in the Leu(1)-, Ser(2)-, Asn(3)-, Ile(4)-, Ile(7)-, Ile(9)-, and Lys(10)-substituted alanine peptides. Residues Ile(4), Ile(7), Ile(9), and Lys(10) were important for neurite outgrowth activity. Congo red staining and electron microscopic examination revealed that the Ile(4), Ile(7), Ile(9), and Ser(12) residues of A119 were required for amyloid-like fibril formation. These data suggest that the Ile residues are critical for the amyloid-like fibril formation, cell attachment, and neurite outgrowth activity of A119. Furthermore, an enantiomer of A119 showed similar amyloid-like fibril formation and increased levels of cell attachment and FAK signal transduction. These findings shed light on the mechanism of amyloid-like fibril formation and demonstrate a relationship between the ability to form amyloid-like fibrils and cell behavior.