HURは、哺乳類の上皮細胞の増殖と極性に少なくとも部分的にΔNp63を介して必要です

RNA結合タンパク質であるHuRは、乳がんの腫瘍維持遺伝子として機能し、腫瘍の成長と予後不良に関連することが知られています。しかし、このタンパク質の細胞機能は、正常な乳腺上皮細胞ではほとんど知られていないままです。ここでは、不死化MCF10A乳腺上皮細胞では、HuRノックダウンが細胞増殖を阻害し、早期老化を促進することを示しました。また、3次元培養では、Hurノックダウンを備えたMCF10A細胞が充填された内腔と細胞外マトリックスタンパク質ラミニンVの異常な発現パターンを形成することを示しました。さらに、HuRノックダウンはΔNP63を増加させますが、MCF10A細胞での野生型P53を減少させることを示しました。さらに、ΔNP63ノックダウンは、MCF10A細胞のHuRノックダウンによって誘発される増殖欠陥を部分的に救助することを示しました。これと一致して、P63 mRNAの3'に翻訳されていない領域に2つのUリッチ要素を特定しました。最後に、HurノックダウンがΔNP63mRNA翻訳を促進するが、p63 mRNAの代謝回転に影響がないことを示しました。一緒に、我々のデータは、HuRが少なくともΔNp63を介して乳腺上皮細胞の細胞増殖と極性を維持することを示唆しています。

HuR, a RNA binding protein, is known to function as a tumor maintenance gene in breast cancer and associated with tumor growth and poor prognosis. However, the cellular function of this protein remains largely unknown in normal mammary epithelial cells. Here, we showed that in immortalized MCF10A mammary epithelial cells, HuR knockdown inhibits cell proliferation and enhances premature senescence. We also showed that in three-dimensional culture, MCF10A cells with HuR knockdown form abnormal acini with filled lumen and an aberrant expression pattern of the extracellular matrix protein laminin V. In addition, we showed that HuR knockdown increases ΔNp63, but decreases wild-type p53, expression in MCF10A cells. Moreover, we showed that ΔNp63 knockdown partially rescues the proliferative defect induced by HuR knockdown in MCF10A cells. Consistent with this, we identified two U-rich elements in the 3'-untranslated region of p63 mRNA, to which HuR specifically binds. Finally, we showed that HuR knockdown enhances ΔNp63 mRNA translation but has no effect on p63 mRNA turnover. Together, our data suggest that HuR maintains cell proliferation and polarity of mammary epithelial cells at least in part via ΔNp63.