活性洗剤溶解H+、K+-ATPaseはモノマーです

H（+）、K（+） - ATPaseポンププロトンまたはヒドロニウムイオンは、胃液の酸性化の原因です。α触媒とβ-グリコシル化サブユニットで構成されています。カチオン転座と膜内のタンパク質の組織との関係はよく理解されていません。ここでは、純粋で機能的に活性に豚の胃胃H（+）、k（+） - 純粋なストークス半径を持つATPaseが6.3 nmのアトパゼを、非イオン性洗剤C（12）E（8）で溶解した後にどのように得られるかを説明します。C（12）E（8）の交換により、Superose 6カラムでTween 20を使用します。質量分光法は、βサブユニットがグリコシル化に起因する9 kDaの過剰な質量を負担していることを示しています。化学分析から、タンパク質1 gあたり0.25 gのリン脂質と約0.024 gのコレステロール結合があります。分析的な超遠心分離は、S（20、）（W）= 7.2±0.1 sで沈降する1つの主要な複合体を示し、少量の不可逆的に集約された材料とともに沈降します。これらのデータから、h（+）、k（+） - atpaseα、147.3 kdaのβプロトマーに対応する浮力分子量が計算されます。重水素水を含む補完的な沈降速度は、結合界面活性剤と脂質0.9-1.4 g/gのα、βプロトマー、および7.1 nmのストークス半径に対応する1.5の合理的な摩擦比を持つαプロトマーの絵を与えます。α（2）、β（2）二量体はデータによって拒否されます。ゲルろ過に結合された光散乱により、溶持h（+）、k（+） - atpaseの単量体状態が確認されます。したがって、α、βH（+）、k（+） - atPaseは少なくとも洗剤で活性であり、他のp型ATPase（2+） - ATPaseおよびNaのために確立されているように、モノマーとしてもっともらしい機能を機能させる可能性があります。（+）、k（+） - atpase。

The H(+),K(+)-ATPase pumps protons or hydronium ions and is responsible for the acidification of the gastric fluid. It is made up of an α-catalytic and a β-glycosylated subunit. The relation between cation translocation and the organization of the protein in the membrane are not well understood. We describe here how pure and functionally active pig gastric H(+),K(+)-ATPase with an apparent Stokes radius of 6.3 nm can be obtained after solubilization with the non-ionic detergent C(12)E(8), followed by exchange of C(12)E(8) with Tween 20 on a Superose 6 column. Mass spectroscopy indicates that the β-subunit bears an excess mass of 9 kDa attributable to glycosylation. From chemical analysis, there are 0.25 g of phospholipids and around 0.024 g of cholesterol bound per g of protein. Analytical ultracentrifugation shows one main complex, sedimenting at s(20,)(w) = 7.2 ± 0.1 S, together with minor amounts of irreversibly aggregated material. From these data, a buoyant molecular mass is calculated, corresponding to an H(+),K(+)-ATPase α,β-protomer of 147.3 kDa. Complementary sedimentation velocity with deuterated water gives a picture of an α,β-protomer with 0.9-1.4 g/g of bound detergent and lipids and a reasonable frictional ratio of 1.5, corresponding to a Stokes radius of 7.1 nm. An α(2),β(2) dimer is rejected by the data. Light scattering coupled to gel filtration confirms the monomeric state of solubilized H(+),K(+)-ATPase. Thus, α,β H(+),K(+)-ATPase is active at least in detergent and may plausibly function as a monomer, as has been established for other P-type ATPases, Ca(2+)-ATPase and Na(+),K(+)-ATPase.