ヒト胚性腎臓（HEK）293細胞の生物学的トランスフェクション

その優れたトランスフェクト可能性により、ヒト胚腎（HEK）293細胞株は、トランスフェクション実験のためのin vitroモデルシステムとして広く使用されています。粒子爆撃、または生物学的技術は、多くの異なる細胞株に効率的に導入遺伝子材料を供給できる物理的トランスフェクションアプローチを提供します。遺伝子ガンによる293個の細胞のトランスフェクションにより、上皮細胞における導入遺伝子発現の検査と、神経生物学のさまざまな質問に関する研究が可能になります。Biolistics TechnologyによるHEK 293細胞のトランスフェクションの本研究では、ルシフェラーゼをコードするプラスミドGWIZ-LUCを使用し、緑色蛍光タンパク質（GFP）をモデル導入遺伝子としてコードするGWIZ-GFPを使用しています。このシステムは、遺伝子ガンヘリウムの圧力、金粒子のサイズ、およびスペーサーの長さなど、実験的な要件と目的に従って調整できるさまざまな砲撃条件で日常的に使用できます。得られた結果は、遺伝子ガンのバイオラッドスペーサーは、マルチウェルプレートに分散した細胞の生物学的トランスフェクションに使用される場合、比較的小さな領域での金粒子の拡散のために最適化されるべきであることを示しています。

Due to its excellent transfectability, the human embryonic kidney (HEK) 293 cell line is widely used as an in vitro model system for transfection experiments. Particle bombardment, or biolistics technology, provides a physical transfection approach that can deliver transgene materials efficiently into many different cell lines. Transfection of 293 cells by gene gun, allows examination of transgene expression in epithelial cells, as well as studies concerning a variety of questions in neurobiology. The present study of transfection of HEK 293 cells by biolistics technology uses the plasmids gWIZ-luc encoding luciferase and gWIZ-GFP encoding green fluorescence protein (GFP) as model transgenes. This system can be routinely used at varying bombarding conditions that can be adjusted according to experimental requirements and purpose, such as gene gun helium pressure, the sizes and the amount of the gold particles and the length of the spacer. The results obtained show that the Bio-Rad spacer for the gene gun should be optimized for travel distance and spreading of gold particles over a relatively small area, when used for biolistic transfection of cells dispersed in multi-well plate.