骨格筋L型Ca2+チャネルにおけるαおよびβサブユニットとII-IIIループの3次元局在化

L型Ca（2+）チャネル（骨格筋のジヒドロピリジン受容体（DHPR）は、DHPRサブユニット（α（1S）またはCA（1S）またはCA（V）1.1、α（2）、α（2）、α（1A）、β（1A）、β）、β）、β（1A）、β）、β（1A）の空間組織をより適切に解決するための電圧センサーとして作用します。YFPとそのn-およびc-末端にそれぞれ結合したビオチンアクセプタードメインを使用した組換えβ（1a）サブユニットを骨格筋から発現させ、電子顕微鏡でイメージし、単一粒子画像分析を担当します。その周囲に沿った5つの角は、本体のいずれかの面から出現します。これは、柔軟なフック型の特徴を形成するα（2）-Δ1サブユニットに起因するものと、Atibody discornibleのAtming discernibleが明らかにしたAtming discernibleのII-IIIループ1.1に対応する反対側にあるα1-β相互作用を定義する単一のドッキングの可能性における電圧依存性ナトリウムチャネルとβサブユニットは、予想よりも膜に密接に関連しているように見えます。

The L-type Ca(2+) channel (dihydropyridine receptor (DHPR) in skeletal muscle acts as the voltage sensor for excitation-contraction coupling. To better resolve the spatial organization of the DHPR subunits (α(1s) or Ca(V)1.1, α(2), β(1a), δ1, and γ), we created transgenic mice expressing a recombinant β(1a) subunit with YFP and a biotin acceptor domain attached to its N- and C- termini, respectively. DHPR complexes were purified from skeletal muscle, negatively stained, imaged by electron microscopy, and subjected to single-particle image analysis. The resulting 19.1-Å resolution, three-dimensional reconstruction shows a main body of 17 × 11 × 8 nm with five corners along its perimeter. Two protrusions emerge from either face of the main body: the larger one attributed to the α(2)-δ1 subunit that forms a flexible hook-shaped feature and a smaller protrusion on the opposite side that corresponds to the II-III loop of Ca(V)1.1 as revealed by antibody labeling. Novel features discernible in the electron density accommodate the atomic coordinates of a voltage-gated sodium channel and of the β subunit in a single docking possibility that defines the α1-β interaction. The β subunit appears more closely associated to the membrane than expected, which may better account for both its role in localizing the α(1s) subunit to the membrane and its suggested role in excitation-contraction coupling.