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Photorhabdus luminescens luxcdabe遺伝子は、強力なLACプロモーターの制御下で修飾されたLucgabcde遺伝子を含む高コピー数プラスミドを使用して、大腸菌K-12に統合されました。このひずみは、P。luminescensの10倍高い生物発光（BL）を放出しました。さまざまな成長条件下でのBL生産が研究されました。両方の細菌株において、BLシグナルの増加は、豊富な成長媒体の光学密度（OD）の増加と相関していました。ただし、対数成長段階では、BL信号はほぼ一定でした。対照的に、最小限の成長媒体では、実質的な成長はなく、BL/セルは豊富な媒体の約5倍でした。BLの動的測定範囲は、大腸菌の10（2）-10（7）コロニー形成単位（CFU）、P。luminescensの10（3）-10（7）CFUでした。BLシグナルの減少はCFUおよびODの減少、つまり殺された細菌細胞の数と相関しているため、異なる抗菌剤の抗菌効果の評価に非常に適していることが証明されました。プレートカウントとは異なり、BL測定を使用して、殺害の動態をリアルタイムで監視できます。異なるサンプルの補体活性は、1つの血清希釈のみを使用して推定できます。形質転換された大腸菌株は、これらの用途ではP. luminescensよりも優れているように見えました。大腸菌は補完的であり、大腸菌の検出限界は1階で、P。luminescensのbl生成システムはかなり低いと思われます。不安定。
Photorhabdus luminescens luxcdabe遺伝子は、強力なLACプロモーターの制御下で修飾されたLucgabcde遺伝子を含む高コピー数プラスミドを使用して、大腸菌K-12に統合されました。このひずみは、P。luminescensの10倍高い生物発光（BL）を放出しました。さまざまな成長条件下でのBL生産が研究されました。両方の細菌株において、BLシグナルの増加は、豊富な成長媒体の光学密度（OD）の増加と相関していました。ただし、対数成長段階では、BL信号はほぼ一定でした。対照的に、最小限の成長媒体では、実質的な成長はなく、BL/セルは豊富な媒体の約5倍でした。BLの動的測定範囲は、大腸菌の10（2）-10（7）コロニー形成単位（CFU）、P。luminescensの10（3）-10（7）CFUでした。BLシグナルの減少はCFUおよびODの減少、つまり殺された細菌細胞の数と相関しているため、異なる抗菌剤の抗菌効果の評価に非常に適していることが証明されました。プレートカウントとは異なり、BL測定を使用して、殺害の動態をリアルタイムで監視できます。異なるサンプルの補体活性は、1つの血清希釈のみを使用して推定できます。形質転換された大腸菌株は、これらの用途ではP. luminescensよりも優れているように見えました。大腸菌は補完的であり、大腸菌の検出限界は1階で、P。luminescensのbl生成システムはかなり低いと思われます。不安定。
Photorhabdus luminescens luxCDABE genes were integrated into E. coli K-12 using a high copy number plasmid containing modified luxABCDE genes under the control of the powerful Lac promoter. This strain emitted 10 times higher bioluminescence (BL) than P. luminescens. BL production under different growth conditions was studied. In both bacterial strains, the increase in BL signal correlated with the increase in optical density (OD) in a rich growth medium. However, at the logarithmic growth phase, the BL signal was roughly constant. By contrast, in minimal growth media, there was no substantial growth and the BL/cell was approximately five times higher than in the rich medium. The dynamic measurement range of BL was 10(2) -10(7) colony-forming units (CFU) in E. coli and 10(3) -10(7) CFU in P. luminescens. Because the decrease in the BL signal correlated with the decrease in CFU and OD, i.e. the number of bacterial cells killed, it proved to be very suitable for assessing the antibacterial effects of different antimicrobial agents. Unlike with plate counting, the kinetics of killing can be monitored on a real-time basis using BL measurements. Complement activities in different samples can be estimated using only one serum dilution. The transformed E. coli strain appeared to be superior to P. luminescens in these applications because E. coli was complement sensitive, the detection limit of E. coli was one order lower and the BL-producing system of P. luminescens appeared to be quite unstable.
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