ATG9小胞は、小胞テザータンパク質TRS85およびYPT1をオートファゴソーム形成部位に補充します

ATG9は、オートファジーに不可欠な膜貫通タンパク質です。新進酵母Saccharomyces cerevisiaeでは、最近、ATG9がATG9小胞と呼ばれる細胞質の小さな小胞に存在することが明らかになりました。ATG9小胞の成分を識別するために、ATG9小胞を精製し、質量分析にかけました。それらのタンパク質組成は他の器官膜とは異なり、特にATG9とATG27がATG9小胞の主要な成分であることがわかりました。これら2つの成分に加えて、TRS85は輸送タンパク質粒子III（TRAPPIII）複合体の特定のサブユニットであり、RAB GTPase YPT1も同定されました。TRS85はATG9と直接相互作用し、TRS85を含むTRAPPIII複合体は、YPT1のATG9小胞との関連を促進します。また、TRS85とYPT1は、ATG9依存的に依存して局所構造に局在していることを示しました。我々のデータは、ATG9小胞がTrappiii複合体とYPT1を前autophagosomal構造に補充することを示唆しています。したがって、小胞テザリング機構は、オートファゴソーム形成の過程で作用します。

Atg9 is a transmembrane protein that is essential for autophagy. In the budding yeast Saccharomyces cerevisiae, it has recently been revealed that Atg9 exists on cytoplasmic small vesicles termed Atg9 vesicles. To identify the components of Atg9 vesicles, we purified the Atg9 vesicles and subjected them to mass spectrometry. We found that their protein composition was distinct from other organellar membranes and that Atg9 and Atg27 in particular are major components of Atg9 vesicles. In addition to these two components, Trs85, a specific subunit of the transport protein particle III (TRAPPIII) complex, and the Rab GTPase Ypt1 were also identified. Trs85 directly interacts with Atg9, and the Trs85-containing TRAPPIII complex facilitates the association of Ypt1 onto Atg9 vesicles. We also showed that Trs85 and Ypt1 are localized to the preautophagosomal structure in an Atg9-dependent manner. Our data suggest that Atg9 vesicles recruit the TRAPPIII complex and Ypt1 to the preautophagosomal structure. The vesicle-tethering machinery consequently acts in the process of autophagosome formation.