DDB1はNS3/4Aプロテアーゼの細胞基質であり、C型肝炎ウイルスの複製に必要です

C型肝炎ウイルス（HCV）感染はしばしば長期の持続性肝炎を引き起こし、最終的に肝硬変および肝細胞癌を引き起こします。HCVエンコードNS3/4Aプロテアーゼは、主要なアダプタータンパク質ビザとTRIFのリグI様受容体とTRIFを切断することにより、HCV免疫回避において重要な役割を果たします。HCVライフサイクルにおけるNS3/4Aの役割をさらに理解するために、生化学精製と質量分析分析により、DDB1をNS3/4Aプロテアーゼの細胞基質として特定しました。NS3/4Aは、HCV感染細胞でDDB1と相互作用し、DDB1を切断しました。突然変異誘発は、NS3/4AがC378の残基でDDB1を切断したことを示しました。DDB1の過剰発現は、HCV複製を増強しましたが、DDB1のノックダウンはHCV複製を劇的に阻害しました。さらに、我々のデータは、NS3/4AプロテアーゼによるDDB1の切断がHCV複製に必要であることを示しました。我々の発見は、DDB1がHCV複製に必要なNS3/4Aの細胞基質であり、HCVと宿主細胞間の相互作用に関する新しい洞察を提供することを示唆しています。

Hepatitis C virus (HCV) infection often causes long-term persistent hepatitis, which eventually leads to liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma. HCV-encoded NS3/4A protease plays an important role in HCV immune evasion by cleaving key adapter proteins VISA and TRIF of the RIG-I-like receptors and Toll-like receptors mediated interferon (IFN) induction pathways. To further understand the roles of NS3/4A in HCV life cycle, we identified DDB1 as a cellular substrate of NS3/4A protease by biochemical purification and mass spectrometry analysis. NS3/4A interacted with DDB1 and cleaved DDB1 in HCV-infected cells. Mutagenesis indicated that NS3/4A cleaved DDB1 at the residue of C378. Overexpression of DDB1 potentiated HCV replication, whereas knockdown of DDB1 dramatically inhibited HCV replication. Furthermore, our data indicated that the cleavage of DDB1 by NS3/4A protease was required for HCV replication. Our findings suggest that DDB1 is a cellular substrate of NS3/4A required for HCV replication and provide new insight into the interaction between HCV and host cells.