中国のHIV型サブタイプB（ '）の薬剤耐性に関連する新規突然変異のスクリーニングと検証

目的：HIV薬耐性に関連する変異は、HIV-1ポリメラーゼドメインで広く特徴付けられていますが、ポリメラーゼドメイン以外の変異も抗ウイルス薬に対する耐性をもたらすことをより多くの研究で検証し​​ています。この研究では、抗レトロウイルス療法（ART）障害を経験している354人の患者と97人のナイーブ療法患者で突然変異が確認されました。抗ウイルス薬への影響が不明な変異は、表現型検査によって検証されました。 方法：ART障害を経験している患者およびナイーブ療法患者から得られたHIVサブタイプB（ '）のPOL配列は、2つのグループ間で異なる変異について分析されました。ナイーブセラピーグループよりもART障害で有意に高い頻度で発生した変異をスタンフォードHIV薬物耐性データベース（SHDB）に提出して、HIV変異と薬剤耐性との相関を分析しました。抗ウイルス薬の反応への影響が不明な変異の場合、スクリーニングされた変異を含むプラスミドを構築するために、部位指向の突然変異誘発アプローチが適用されました。AZT、EFV、およびNVPへの50％阻害濃度（IC（50））を測定して、抗ウイルス薬に対する遺伝的に構築されたウイルスの反応を決定しました。 結果：RT領域の6位置での7つの変異、D123E、V292I、K366R、T369A、T369V、A371VおよびI375Vは、ART障害グループよりもナイーブ療法グループよりも頻繁に発生しました。これらのHIV変異体の表現型特性は、変異A371VとT369Vを伴う構造化されたウイルスがそれぞれAZTおよびEFVに対して二重耐性を示し、他の5つの変異は弱い耐性を示したことを明らかにしました。NVPへの反応に対する他の6つの変異の影響は最小限でしたが、変異T369VはNVPに対する耐性を高める可能性があります。 結論：この研究は、サブタイプB 'のRT C末端での変異が、変異が単独で発生した場合、RT阻害剤に対する耐性をもたらす可能性があることを実証しましたが、一部の変異は抗ウイルス薬に対する感受性を促進できることを実証しました。

OBJECTIVE: Mutations associated with HIV drug resistance have been extensively characterized at the HIV-1 polymerase domain, but more studies have verified that mutations outside of the polymerase domain also results in resistance to antiviral drugs. In this study, mutations were identified in 354 patients experiencing antiretroviral therapy (ART) failure and in 97 naïve-therapy patients. Mutations whose impact on antiviral drugs was unknown were verified by phenotypic testing. METHODS: Pol sequences of HIV subtype B(') obtained from patients experiencing ART failure and from naïve-therapy patients were analyzed for mutations distinct between two groups. Mutations that occurred at a significantly higher frequency in the ART failure than the naïve-therapy group were submitted to the Stanford HIV Drug Resistance Database (SHDB) to analyze the correlation between HIV mutations and drug resistance. For mutations whose impact on the antiviral drug response is unknown, the site-directed mutagenesis approach was applied to construct plasmids containing the screened mutations. 50% inhibitory concentration (IC(50)) to AZT, EFV and NVP was measured to determine the response of the genetically constructed viruses to antiviral drugs. RESULTS: 7 mutations at 6 positions of the RT region, D123E, V292I, K366R, T369A, T369V, A371V and I375V, occurred more frequently in the ART failure group than the naïve-therapy group. Phenotypic characterization of these HIV mutants revealed that constructed viruses with mutations A371V and T369V exhibited dual resistance to AZT and EFV respectively, whereas the other 5 mutations showed weak resistance. Although the impact of the other six mutations on response to NVP was minimal, mutation T369V could enhance resistance to NVP. CONCLUSIONS: This study demonstrated that mutations at the RT C-terminal in subtype B' could result in resistance to RT inhibitors if the mutations occurred alone, but that some mutations could promote susceptibility to antiviral drugs.