Legionella Pneumophila DOT/ICMタイプIV分泌システムによるタンパク質転座を決定する方法

レジオネラ肺炎球菌レジオネア病の原因剤は、宿主細胞プロセスを積極的に操作して、その複製を許容する膜結合複製液胞を確立します。このような複製ニッチの確立には、宿主細胞に大量のエフェクターを移行するDOT/ICMタイプIV分泌システムが必要です。特定のタンパク質が輸送体の基質であるかどうかを判断することは、その後の機能研究の前提条件です。したがって、過去10年間に、宿主細胞へのタンパク質のDOT/ICM依存性送達を測定するために、さまざまな方法が開発されました。これらの方法と適切なスクリーニング戦略の組み合わせにより、270を超える移行されたタンパク質の識別が可能になりました。これらの取り組みは、L。pneumophilaとその宿主との相互作用におけるこれらのタンパク質の役割をさらに研究するための強固な基盤を築いてきました。ここでは、これらの方法の実験的な詳細をまとめました。

Legionella pneumophila the causative agent of Legionnaires' disease, actively manipulates host cell -processes to establish a membrane-bound replication vacuole permissive for its replication. Establishment of such replication niche requires the Dot/Icm type IV secretion system which translocates a plethora of effectors into host cells. Determining whether a particular protein is a substrate of the transporter is a prerequisite for subsequent functional studies. Thus, a variety of methods have been developed in the last decade to measure Dot/Icm-dependent delivery of protein into the host cell. The combination of these methods and the appropriate screening strategies has allowed for the identification of more than 270 translocated proteins. These efforts have laid a solid foundation for further study of the roles of these proteins in the interactions between L. pneumophila and its host. Here, we summarized the experimental details of these methods.