ヒトT細胞機能に対するCCR5阻害剤Maravirocのin vitro効果

背景：CCケモカイン受容体5（CCR5）拮抗薬Maravirocでの治療中に、その抗ウイルス効果に加えて、いくつかの潜在的な免疫学的利点が観察されています。私たちの目的は、Tリンパ球機能と恒常性に対するCCR5遮断のin vitro効果を分析することでした。 方法：HIV陰性（n = 28）と処理されたHIV陽性（n = 27）の両方の両方からの末梢血単核細胞（PBMC）は、in vitroで異なる濃度のマラビロック（0.1〜100μm）にさらされました。T細胞の活性化への影響は、Flowサイトメトリーを使用してCCR5密度だけでなく、CD69、CD38、HLA-DR、CD25受容体の発現を測定することにより分析しました。自発性およびケモカイン誘発性走化性は、トランスウェル移動アッセイによって測定され、ポリクローナル誘発性増殖はリンパ増殖アッセイとカルボキシフルオレソシンサシミジルエステル染色によって評価されました。 結果：MARAVIROCは、低用量（0.1μM）でさえ、活性化されたT細胞でCCR5表面発現を増加させます。高濃度のマラビロックでの活性化マーカーの周波数と平均蛍光強度でわずかな違いが検出されました。CD25、CD38、およびHLA-DRの発現は、CD4+およびCD8+ Tリンパ球の両方で減少する傾向がありましたが、CD69の発現は増加する傾向がありました。Maravirocは、用量依存的にケモカインによって誘導されるT細胞移動を明確に阻害します。さらに、100μMで、MaravirocはT細胞の増殖を阻害する傾向があります。 結論：これらのデータは、Maravirocへのin vitroでの曝露がTリンパ球上のいくつかの活性化発現マーカーを減少させ、化学誘引物質への移動も減少させることを示した。これらの結果は、CCR5遮断の追加の免疫学的効果をサポートし、MaravirocがT細胞の活性化に直接影響を与え、リンパ節のリンパ球の閉じ込めを減らすことにより、HIV関連の慢性炎症と活性化を阻害する潜在的な能力を持っている可能性があることを示唆しています。

BACKGROUND: Several potential immunological benefits have been observed during treatment with the CC chemokine receptor 5 (CCR5) antagonist maraviroc, in addition to its antiviral effect. Our objective was to analyse the in vitro effects of CCR5 blockade on T lymphocyte function and homeostasis. METHODS: Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from both HIV-negative (n=28) and treated HIV-positive (n=27) individuals were exposed in vitro to different concentrations of maraviroc (0.1-100 μM). Effects on T cell activation were analysed by measuring the expression of the CD69, CD38, HLA-DR and CD25 receptors as well as CCR5 density using flow cytometry. Spontaneous and chemokine-induced chemotaxis were measured by transwell migration assays, and polyclonal-induced proliferation was assessed by a lymphoproliferation assay and carboxyfluorescein succinimidyl ester staining. RESULTS: Maraviroc increases CCR5 surface expression on activated T cells, even at low doses (0.1 μM). Slight differences were detected in the frequency and mean fluorescence intensity of activation markers at high concentrations of maraviroc. Expression of CD25, CD38 and HLA-DR tended to decrease in both CD4+ and CD8+ T lymphocytes, whereas expression of CD69 tended to increase. Maraviroc clearly inhibits T cell migration induced by chemokines in a dose-dependent manner. Moreover, at 100 μM, maraviroc tends to inhibit T cell proliferation. CONCLUSIONS: These data showed that in vitro exposure to maraviroc decreases some activation expression markers on T lymphocytes and also migration towards chemoattractants. These results support the additional immunological effects of CCR5 blockade and suggest that maraviroc might have potential capacity to inhibit HIV-associated chronic inflammation and activation, both by directly affecting T cell activation and by reducing entrapment of lymphocytes in lymph nodes.