シアル酸結合レクチンを使用したL1210細胞の表面上のP糖タンパク質の過剰発現によって誘発されるグリコミック変化の検出

P糖タンパク質（P-gp）の過剰発現は、腫瘍性細胞で多剤耐性の最も頻繁に観察される原因です。我々の実験では、P-GPは、ビンクリスチン（R細胞）を選択することにより、L1210マウス白血病細胞（S細胞）で発現するか、ヒトP-gp（T細胞）をコードする遺伝子とトランスフェクションを選択しました。細胞表面糖のリモデリングは、二次細胞応答としてL1210細胞のP-GP発現と関連しています。この研究では、Sambucus nigra Agglutinin（SNA）、小麦胚細胞性凝集素（WGA）、およびMaackia Amurensis Agglutinin（MAA）による細胞表面の糖の変化を監視しました。シアル酸は、SNAをしっかりと結合するα-2,6分岐糖を介して、主にS、R、およびT細胞の表面に関連しています。α-2,3分岐糖を介して細胞表面に関連するシアル酸の存在は無視でき、MAA（この枝を認識）の結合はSNAよりもはるかに顕著ではありませんでした。WGAはSNAよりも細胞死を誘発し、細胞表面に結合し、3つのL1210細胞変異体すべてをWGAよりも効果的に凝集させました。したがって、レクチンが細胞死を誘発する能力は、それらの結合効率と凝集効力と相関しませんでした。S細胞と比較して、P-GP陽性RおよびT細胞には、細胞表面により多くのN-アセチルグルコサミンが含まれており、これはWGA結合の改善に関連しています。L1210細胞の両方のP-gp陽性変異体は、P-gpプロトタイプ薬としてのビンクリスチンに対して強く耐性があります。この耐性は、シアリダーゼによる細胞表面からの末端シアリル残基の自由化によって変化することはできませんでした。

P-glycoprotein (P-gp) overexpression is the most frequently observed cause of multidrug resistance in neoplastic cells. In our experiments, P-gp was expressed in L1210 mice leukemia cells (S cells) by selection with vincristine (R cells) or transfection with the gene encoding human P-gp (T cells). Remodeling of cell surface sugars is associated with P-gp expression in L1210 cells as a secondary cellular response. In this study, we monitored the alteration of cell surface saccharides by Sambucus nigra agglutinin (SNA), wheat germ agglutinin (WGA) and Maackia amurensis agglutinin (MAA). Sialic acid is predominantly linked to the surface of S, R and T cells via α-2,6 branched sugars that tightly bind SNA. The presence of sialic acid linked to the cell surface via α-2,3 branched sugars was negligible, and the binding of MAA (recognizing this branch) was much less pronounced than SNA. WGA induced greater cell death than SNA, which was bound to the cell surface and agglutinated all three L1210 cell-variants more effectively than WGA. Thus, the ability of lectins to induce cell death did not correlate with their binding efficiency and agglutination potency. Compared to S cells, P-gp positive R and T cells contain a higher amount of N-acetyl-glucosamine on their cell surface, which is associated with improved WGA binding. Both P-gp positive variants of L1210 cells are strongly resistant to vincristine as P-gp prototypical drug. This resistance could not be altered by liberalization of terminal sialyl residues from the cell surface by sialidase.