ヒキガエルRhinella Arenarumの精巣における糖質コルチコイド受容体の季節変化と調節

いくつかの研究は、野生の自由生活脊椎動物が季節的に血漿グルココルチコイドを調節することを示しています。ただし、グルココルチコイドだけでなく、受容体の量も生物学的反応を決定する上で重要です。これに関連して、グルココルチコイドに対するグルココルチコイド受容体（GR）の季節的調節は、グルココルチコイドに対する反応を調節するために重要です。Rhinella Arenarumは、血漿グルココルチコイドの季節変動を示す尾側であり、精巣細胞質ゾルGRの結合部位（B（MAX））の数（B（MAX））の数です。この作業では、精巣のGRタンパク質の年間パターンが季節によって変化し、in vitroアプローチによって、GR B（MAX）およびタンパク質レベルの調節におけるグルココルチコイド、アンドロゲン、およびメラトニンの役割によって変化するかどうかを評価しました。この目的のために、精巣を2つの生理学的濃度のメラトニン（40および200 pg/ml）で処理し、ルジンドール（メラトニン受容体拮抗薬）を伴わない。テストステロン、シアノケトン（ステロイド酸化の阻害剤）またはカソデックス（アンドロゲン受容体拮抗薬）;またはデキサメタゾンまたはRU486（GR拮抗薬）を使用。治療後、B（最大）とタンパク質レベルは、それぞれ[（3）H]デキサメタゾンとウエスタンブロットの結合によって決定されました。結果は、GRタンパク質が冬に減少することを示しました。メラトニンによるin vitro治療は、受容体を介したメカニズムによってこのパラメーターを減少させる最低濃度で、B（最大）に二相性効果をもたらしました。しかし、メラトニンはGRタンパク質レベルに影響を与えませんでした。逆に、高濃度のデキサメタゾンはGRタンパク質とアンドロゲンを上方制御し、B（MAX）もタンパク質レベルも変化させませんでした。これらの発見は、血漿メラトニンとグルココルチコイドの季節変化が、R。arenarumの精巣におけるグルココルチコイドの効果を調節することを示唆しています。

Several studies indicate that wild free-living vertebrates seasonally regulate plasma glucocorticoids. However, not only glucocorticoids but also the amount of receptors is important in determining biological responses. In this context, seasonal regulation of glucocorticoid receptor (GR) is crucial to modulate the response to glucocorticoids. Rhinella arenarum is an anuran exhibiting seasonal variations in plasma glucocorticoids and also in the number of binding sites (B(max)) of the testicular cytosolic GR. In this work, we evaluated if the annual pattern of GR protein in the testis varies seasonally and, by an in vitro approach, the role of glucocorticoids, androgens, and melatonin in the regulation of the GR B(max) and protein level. For this purpose, testes were treated with two physiological concentrations of melatonin (40 and 200 pg/ml), with or without luzindole (melatonin-receptor antagonist); with testosterone, cyanoketone (inhibitor of steroidogenesis) or casodex (androgen-receptor antagonist); or with dexamethasone or RU486 (GR antagonist). After treatments, B(max) and protein level were determined by the binding of [(3)H]dexamethasone and Western blot, respectively. Results showed that GR protein decreases in the winter. The in vitro treatment with melatonin produced a biphasic effect on the B(max) with the lowest concentration decreasing this parameter by a receptor-mediated mechanism. However, melatonin had no effect on the GR protein level. Conversely, a high concentration of dexamethasone up-regulated the GR protein and androgens neither changed the B(max) nor the protein level. These findings suggest that seasonal changes in plasma melatonin and glucocorticoids modulate the effect of glucocorticoids in the testis of R. arenarum.