VLDL脂肪分解生成物に関連する食後のapoeアイソフォームと立体構造の変化は、単球炎症を調節する

目的：循環の増加非常に低密度のリポタンパク質（VLDL）および循環リポポリサッカ糖（LPS）の増加を特徴とする食後の高脂肪血症は、血管損傷のメカニズムとして提案されています。私たちの目標は、単球の活性化における食後リポタンパク質、LPS、およびAPOE3とAPOE4の相互作用を調べることでした。 方法と結果：リン脂質小胞に複合したAPOE3は、LPS誘発THP-1単球サイトカイン発現を減衰させ、APOE4が発現を増加させることを示しました。Elisaは、APOE3がAPOE4よりも高い親和性でLPSに結合することを明らかにしました。APOE3の特定のアミノ酸に掲載された部位指向スピンラベルの電子常磁性共鳴（EPR）分光法は、LPSが通常脂質結合に関連する立体構造変化を妨げることを示しました。具体的には、APOE4と比較して、E3様R112→SER変異がLPSにさらされると自己関連性の増加を示すAPOEは、より強いAPOE3-LPS相互作用と一致します。さらに、正常なヒトドナーからの空腹時VLDLの脂肪分解により、LPS誘発性TNFα分泌は単球からの分泌を減衰し、食後のVLDLよりも大幅に減衰しました。この効果は、E3/E3ドナーからの空腹時VLDL脂肪分解産物を使用して再現されましたが、E4/E4被験者からではなく、空腹時VLDLのAPOE3がAPOE4よりもLPS誘発性炎症を容易に防ぐことを示唆しています。 結論：VLDLに関連する食後のapoEアイソフォームと立体構造の変化は、血管炎症を劇的に調節します。

OBJECTIVE: Postprandial hyperlipemia, characterized by increased circulating very low-density lipoproteins (VLDL) and circulating lipopolysaccharide (LPS), has been proposed as a mechanism of vascular injury. Our goal was to examine the interactions between postprandial lipoproteins, LPS, and apoE3 and apoE4 on monocyte activation. METHODS AND RESULTS: We showed that apoE3 complexed to phospholipid vesicles attenuates LPS-induced THP-1 monocyte cytokine expression, while apoE4 increases expression. ELISA revealed that apoE3 binds to LPS with higher affinity than apoE4. Electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy of site-directed spin labels placed on specific amino acids of apoE3 showed that LPS interferes with conformational changes normally associated with lipid binding. Specifically, compared to apoE4, apoE bearing the E3-like R112→Ser mutation displays increased self association when exposed to LPS, consistent with a stronger apoE3-LPS interaction. Additionally, lipolysis of fasting VLDL from normal human donors attenuated LPS-induced TNFα secretion from monocytes to a greater extent than postprandial VLDL, an effect partially reversed by blocking apoE. This effect was reproduced using fasting VLDL lipolysis products from e3/e3 donors, but not from e4/e4 subjects, suggesting that apoE3 on fasting VLDL prevents LPS-induced inflammation more readily than apoE4. CONCLUSION: Postprandial apoE isoform and conformational changes associated with VLDL dramatically modulate vascular inflammation.