液体クロマトグラフィータンデム質量分析によるヒト尿中のベンゾトリアゾールとベンゾチアゾールの測定

ベンゾトリアゾール（BTR）およびベンゾチアゾール（BTH）誘導体は、さまざまな産業および消費者製品で使用されており、環境で発生することが報告されています。分析方法がないため、BTRとBTHへの人間への暴露はまだ不明です。この研究では、ヒト尿中の5つの1,2,3-ベンゾトリアゾールと5つの1,3-ベンゾチアゾールを同時に決定するために、液体クロマトグラフィーエレクトロスプレーイオン化タンデム質量分析（LC-ESI（+）MS/MS）メソッドが開発されました。標的ベンゾトリアゾールは、1H-ベンゾトリアゾール、1-ヒドロキシ - ベンゾトリアゾール、トリルトリアゾール、Xylyltriazole（OR 5,6-ジメチル-1H-ベンゾトリアゾール）、および5-クロロ - ベンゾトリアゾール、およびベンゾチアゾールはベンゾチアゾールでした。2-ヒドロキシ - ベンゾチアゾール、2-メチルチオベンゾチアゾール、2-アミノベンゾチアゾール、および2-チオシアノメチルチオ - ベンゾチアゾール。尿標本をβ-グルクロニダーゼと酵素的に脱化させ、BTRとBTHの総濃度（つまり、遊離 +共役型）の測定のために固相抽出（SPE）手順で抽出しました。さらに、SPEとLLE間の抽出効率の比較のために、液液抽出（LLE）メソッドが開発されました。検出限界（LODS）は、0.07（2-アミノベンゾチアゾール）からSPE法の場合は4.0 ng/ml（ベンゾチアゾール）、LLE法の0.04（トリルトリアゾール）から6.4 ng/ml（ベンゾチアゾール）の範囲でした。ギリシャのアテネから収集された合計100個の尿標本を、酵素的脱共和化とSPEによって分析しました。ベンゾチアゾールとトリルトリアゾールが頻繁に発見され、それらの濃度は数ng/mlのオーダーでした。私たちの知る限り、これはヒト尿中の10個のBTRおよびBTH化合物の発生に関する最初の研究です。

Benzotriazole (BTR) and benzothiazole (BTH) derivatives are used in a wide variety of industrial and consumer products and have been reported to occur in the environment. Owing to a lack of analytical methods, human exposure to BTR and BTH is still unknown. In this study, a liquid chromatography-electrospray ionization tandem mass spectrometry (LC-ESI(+)MS/MS) method was developed for simultaneous determination of five 1,2,3-benzotriazoles and five 1,3-benzothiazoles in human urine. The target benzotriazoles were 1H-benzotriazole, 1-hydroxy-benzotriazole, tolyltriazole, xylyltriazole (or 5,6-dimethyl-1H-benzotriazole), and 5-chloro-benzotriazole, and the target benzothiazoles were benzothiazole, 2-hydroxy-benzothiazole, 2-methylthio-benzothiazole, 2-amino-benzothiazole, and 2-thiocyanomethylthio-benzothiazole. Urine specimens were enzymatically deconjugated with β-glucuronidase and extracted by a solid-phase extraction (SPE) procedure for the measurement of total concentrations (i.e., free + conjugated forms) of BTRs and BTHs. Additionally, a liquid-liquid extraction (LLE) method was developed for comparison of extraction efficiencies between SPE and LLE. The limits of detection (LODs) ranged from 0.07 (2-amino-benzothiazole) to 4.0 ng/mL (benzothiazole) for the SPE method and from 0.04 (tolyltriazole) to 6.4 ng/mL (benzothiazole) for the LLE method. A total of 100 urine specimens, collected from Athens, Greece, were analyzed by enzymatic deconjugation and SPE. Benzothiazole and tolyltriazole were found frequently, and their concentrations were on the order of a few ng/mL. To our knowledge, this is the first study on the occurrence of 10 BTR and BTH compounds in human urine.