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Macromolecular bioscience2013Feb01Vol.13issue(2)

デンドリグラフトポリ(L-リシン)によって媒介されるin vitroトランスフェクション:構造と分子サイズの効果

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

樹状突起ポリ(L-リシン)(DGL)は、非ウイルス遺伝子配達ベクターとして適用される有望なナノ材料を構成します。この研究では、生成(つまり分子サイズ)がトランスフェクションの有効性に影響する方法の関係の体系的な説明に特に重点を置いて、4つのDGL世代のトランスフェクション能力を評価します。Hep2細胞を使用して、修飾されていないDGLのプラスミドを供給する能力は、JetPEIの大きさよりも大きいことを実証しました。一方、EGFPで安定して導入されたHep2細胞株を使用して、DGL G5はリポフェクタミン2000と同じ効率でsiRNAオリゴヌクレオチドを供給することが観察されました。さらなる実験では、DGLはDNAに結合し、DNase I攻撃に対してそれを保護し、細胞に内在化することが示されました。

樹状突起ポリ(L-リシン)(DGL)は、非ウイルス遺伝子配達ベクターとして適用される有望なナノ材料を構成します。この研究では、生成(つまり分子サイズ)がトランスフェクションの有効性に影響する方法の関係の体系的な説明に特に重点を置いて、4つのDGL世代のトランスフェクション能力を評価します。Hep2細胞を使用して、修飾されていないDGLのプラスミドを供給する能力は、JetPEIの大きさよりも大きいことを実証しました。一方、EGFPで安定して導入されたHep2細胞株を使用して、DGL G5はリポフェクタミン2000と同じ効率でsiRNAオリゴヌクレオチドを供給することが観察されました。さらなる実験では、DGLはDNAに結合し、DNase I攻撃に対してそれを保護し、細胞に内在化することが示されました。

Dendritic poly(L-lysines) (DGL) constitute promising nanomaterials applicable as a nonviral gene-delivery vector. In this study, we evaluate the transfection abilities of four DGL generations with special emphasis on the systematic description of the relationship of how generation (i.e., molecule size) affects the transfection efficacy. Using Hep2 cells, we demonstrated that the capability of unmodified DGL to deliver plasmid is of a magnitude lower than that of jetPEI. On the other hand, employing the Hep2 cell line stably transduced with eGFP, we observed that DGL G5 delivers the siRNA oligonucleotide with the same efficiency as Lipofectamine 2000. In further experiments, it was shown that DGL affords excellent ability to bind DNA, protect it against DNase I attack, and internalize it into cells.

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