グルココルチコイドは、ヒト脂肪組織外植物培養における24時間の時計遺伝子発現に影響します

目的：まず、クロックがBMAL1およびPER2と比較してin vitroでヒト内臓（V）および皮下脂肪組織（AT）で概日発現を示すかどうかを調べ、第二に、グルココルチコイド類似体デキサメタソンの可能性のある効果を調査するために）陽性および負の時計遺伝子の発現について。 被験者と方法：VATおよびSAT生検は、病的な肥満女性から得られました（ボディマス指数≥40kg/m（2））（n = 6）。クロック遺伝子のリズミカルな発現パターンと、クロック、Per2およびBmal1発現、（Dexなし）のコントロール、およびDexで処理された外植片（2時間）に対するDexの効果を調査するために、24時間培養し、遺伝子発現をで分析しました。次の時間：10：00時間、14：00時間、18：00時間、22：00時間、02：00 h、および06:00 h、QRT-PCRを使用します。 結果：クロック、BMAL1、およびPer2発現は、VATとSATの両方の外植片の両方で概日パターンを示し、典型的な24時間の正弦波曲線に調整されました。Per2式（負の要素）は、sat（VATには存在しない状況）のBMAL1式（両方の正常性）との時計に関して、およびbMAL1式（両方の肯定的要素）との位相に関して反周期にありました。陽性と陰性の両方のクロック遺伝子発現パターンに対するDex曝露の顕著な効果が観察されました。実際、DEX処理により、すべての遺伝子と両方の組織で24時間未満の期間で、変化したパターンに向かってリズムパターンを変更しました。 結論：クロックとBMAL1（正のクロック要素）およびPer2（負）mRNAレベルの24時間のパターンが、ヒト脂肪脱植物で観察されました。これらのパターンは、デキサメタゾン曝露によって変更されました。

AIMS: to examine firstly whether CLOCK exhibits a circadian expression in human visceral (V) and subcutaneous (S) adipose tissue (AT) in vitro as compared with BMAL1 and PER2, and secondly to investigate the possible effect of the glucocorticoid analogue dexamethasone (DEX) on positive and negative clock genes expression. SUBJECTS AND METHODS: VAT and SAT biopsies were obtained from morbid obese women (body mass index ≥ 40 kg/m(2)) (n = 6). In order to investigate rhythmic expression pattern of clock genes and the effect of DEX on CLOCK, PER2 and BMAL1 expression, control AT (without DEX) and AT explants treated with DEX (2 hours) were cultured during 24 h and gene expression was analyzed at the following times: 10:00 h, 14:00 h, 18:00 h, 22:00 h, 02:00 h and 06:00 h, using qRT-PCR. RESULTS: CLOCK, BMAL1 and PER2 expression exhibited circadian patterns in both VAT and SAT explants that were adjusted to a typical 24 h sinusoidal curve. PER2 expression (negative element) was in antiphase with respect to CLOCK and in phase with BMAL1 expression (both positive elements) in the SAT (situation not present in VAT). A marked effect of DEX exposure on both positive and negative clock genes expression patterns was observed. Indeed, DEX treatment modified the rhythmicity pattern towards altered patterns with a period lower than 24 hours in all genes and in both tissues. CONCLUSIONS: 24 h patterns in CLOCK and BMAL1 (positive clock elements) and PER2 (negative element) mRNA levels were observed in human adipose explants. These patterns were altered by dexamethasone exposure.