[Astragalusは、ヒト羊膜上皮細胞（Wish）を誘導してニューロンに分化し、Notch1の発現を阻害し、細胞の生存を促進します]

この研究の目的は、アストラガルスのヒト羊膜上皮株の希望の分化に対するニューロン、Notch1遺伝子および細胞生存率の発現に対する影響を調査することでした。願いは、Astragalusグループ（4つのサブグループ）、すべてのトランスレチノイン酸（RA）グループおよびコントロールグループにランダムに分割されました。AstragalusグループとRAグループは、それぞれ化学誘導RAとAstragalusを使用して神経細胞に分化するように誘導されました。3つのグループの誘導細胞のニューロン特異的エノラーゼ（NSE）、微小管関連タンパク質2（MAP-2）、ネスチンおよびGFAPの発現は、免疫細胞化学法を使用して検出されました。RT-PCRは、OCT4、Notch1、Hes1、ネスチン、およびNSEの発現を検出するためにさらに使用されました。細胞生存率は、メチルチアゾリルテトラゾリウム法によって測定されました。コンバート顕微鏡の下では、ウィッシュ細胞がその形状を変え始め、24時間またはRAによって12時間誘導された細胞体からいくつかの軸索または樹状突起様プロセスがあることが観察されました。100μL/mLのアストラガルス誘導群におけるNSEおよびMAP-2の陽性細胞速度は、48時間のRA誘導群の陽性（P <0.05）よりも少なかったが、対照群よりも高かった。Astragalusグループの細胞生存率は、RAグループの生存率よりも高かった（P <0.05）。一方、100μl/mlのアストラガルス誘発グループにおけるネスチンおよびGFAPの陽性細胞速度は、48時間のRA誘導群の陽性よりも高かった（P <0.05）。2つの誘導群におけるネスチンの陽性細胞速度は、対照群のネスチン速度よりも低かった。RT-PCRは、RAおよびAstragalus（100μl/ml）グループでのOCT4、Notch1、およびHes1の発現が対照群の発現よりも少ないことを示しましたが、NSEの発現はコントロールグループの発現よりも高かったことが示されました。これらの結果は、Astragalus（特に100μl/ml、48時間）とRAがヒト羊膜上皮株の希望細胞をニューロン様細胞に誘導できることを示唆していますが、Astragalus誘導はRA誘導よりも高い細胞生存率を持ち、NotCh1シグナル分子の発現はinduction中に阻害されます。

The aim of the study was to investigate the effect of astragalus on differentiation of human amniotic epithelial cell line WISH into neurons, the expression of Notch1 gene and cell viability. WISH were randomly divided into astragalus group (4 subgroups), alltransretinoic acid (RA) group and control group. Astragalus group and RA group were induced to differentiate into neurocytes by using chemical inducer RA and astragalus, respectively. The expression of neuron-specific enolase (NSE), microtubule associated protein 2 (MAP-2), Nestin and GFAP of induced cells in three groups were detected using immunocytochemical method. RT- PCR was further used to detect the expression of Oct4, Notch1, Hes1, Nestin and NSE. The cell viability was measured by methyl thiazolyl tetrazolium methods. Under the convert microscope it was observed that WISH cells started to change their shape, and there were several axon or dendrite-like processes out from the cell body induced by astragalus for 24 h or RA for 12 h. The positive cell rates of NSE and MAP-2 in 100 μL/mL astragalus-induced group were less than those in RA-induced group at 48 h (P < 0.05), but higher than those in control group. Cell viability in astragalus group was higher than that of RA group (P < 0.05). While the positive cell rates of Nestin and GFAP in 100 μL/mL astragalus-induced group were higher than those in RA-induced group at 48 h (P < 0.05). The positive cell rates of Nestin in the two induced groups were lower than those in control group. RT-PCR showed that the expressions of Oct4, Notch1 and Hes1 in RA and astragalus (100 μL/mL) groups were less than those in control group, but the expression of NSE was higher than that in control group. These results suggest that astragalus (especially at 100 μL/mL, 48 h) and RA can both induce human amniotic epithelial cell line WISH cells into neuron-like cells, but astragalus induction has a higher cell survival rate than RA induction, and the expression of Notch1 signal molecules is inhibited during the induction.