フィチン酸およびTNF-αにさらされたヒト結腸癌細胞株培養における可溶性間細胞接着分子-1および可溶性E-カドヘリン濃度に対するセレコキシブの影響

可溶性間細胞間接着分子（SICAM-1）および可溶性E-カドヘリン（SE-カドヘリン）などの可溶性接着分子は、腫瘍の浸潤と転移の発生に重要な役割を果たします。結腸癌患者の体液中の体液中の濃度が上昇したことが観察されました。鎮痛剤、抗炎症性、および抗細胞活性に加えて、シクロオキシゲナーゼ-2（COX-2）の選択的阻害剤であるセレコキシブは、結腸癌の発生を阻害し、転移のリスクを減らすことができます。結腸癌の食事成分などの追加要因は、サイトカインなどの薬物の治療効果に影響を与える可能性があります。TNF -alpha（腫瘍壊死因子 - アルファ）はサイトカインであり、炎症性および癌疾患の患者の血清で濃度が大幅に増加します。最新の研究では、高繊維誘導体であるミオイノシトール誘導体であるフィチン酸（IP6）が高繊維食に存在する可能性があることが実証されています。本研究の目的は、IP6とTNF-αに同時に曝露した形質転換された上皮結腸細胞培養におけるSICAM-1およびSE-カドヘリン濃度に対するセレコキシブの影響を評価することでした。さらに、露出した細胞のコラーゲンIの接着は評価されました。HT-29およびCACO-2細胞は、50 ng/mLセレコキシブ、1.0 mM IP6、および100 ng/mL TNF-alphaの存在下で培養され、それらの組み合わせ：TNF-alpha Plus IP6、TNF-Alpha Plus Celecoxib、IP6 Plus Celecoxib、およびTNF-Alpha with celecoxib with celecoxib with for 96 h。露出していない細胞株培養物は、コントロールとして機能しました。SICAM-1およびSE-カドヘリンの濃度は、Quantikine-Human SICAM-1/CD54 ImmunoAssayおよびQuantikine-Human SE-Cadherin ImmunoAssayを使用した酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）によって培地で測定されました。得られた結果はすべて、mlあたりのngとして表されました。接着アッセイでは、細胞をIP6（0.5、1.0および2.0 mm）、TNF-alpha（100 ng/ml）、セレコキシブ（50 ng/ml）、およびその組み合わせで90分間インキュベートしました。蛍光値480 nm/530 nmは、コラーゲンIに付着した細胞におけるDNAの濃度を反射しました。得られた結果は、選択的COX-2阻害剤であるセレコキシブ（50 ng/mL）が、HT-29およびCACO-2のHT-29およびCACO-2を変換したHT-29およびCACO-2のCACO-2を変換したCACO-2のSE-カドヘリン濃度を大幅に減少させることを示しています。TNF-alpha（100 ng/ml）。コラーゲンへの細胞接着特性の減少Iは、1.0または2.0 mm IP6および1.0または2.0 mm IP6と100 ng/ml TNF-alphaに曝露した細胞培養に対する50 ng/mLセレコキシブの影響下で観察されました。

Soluble adhesion molecules such as soluble intercellular adhesion molecules-1 (sICAM-1) and soluble E-cadherin (sE-cadherin) play important role in tumor invasion and the development of metastasis. It was observed that their concentrations in body fluids of patients with colon cancer were elevated. Celecoxib, a selective inhibitor of cyclooxygenase-2 (COX-2) besides its analgesic, anti-inflammatory, and antipyretic activity is able to inhibit development of colon cancer and reduce risk of metastasis. The additional factors, e.g., dietary components in colon cancer, may influence therapeutic effect of drugs, such as cytokines. TNF-alpha (tumor necrosis factor - alpha) is a cytokine, which concentration significantly increases in serum of patients with inflammatory and cancer diseases. The latest studies demonstrate, that phytic acid (IP6), a myo-inositol derivative, abundantly present in high-fiber diets could substantially reduce colon cancer incidence. The aim of the present study was to evaluate the influence of celecoxib on sICAM-1 and sE-cadherin concentrations in transformed epithelial colon cell cultures simultaneously exposed to IP6 and TNF-alpha. Additionally, the adhesion of the exposed cells to collagen I was assessed. HT-29 and Caco-2 cells were cultured in the presence of 50 ng/mL celecoxib, 1.0 mM IP6, and 100 ng/mL TNF-alpha, and their combination: TNF-alpha plus IP6, TNF-alpha plus celecoxib, IP6 plus celecoxib, and TNF-alpha with celecoxib plus IP6, for 96 h. Nonexposed cell line cultures served as controls. Concentrations of sICAM-1 and sE-cadherin were measured in the culture medium by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using Quantikine - Human sICAM-1/CD54 Immunoassay and Quantikine-Human sE-Cadherin Immunoassay. All the results obtained were expressed as ng per mL. In the adhesion assay, the cells were incubated with IP6 (0.5, 1.0 and 2.0 mM), TNF-alpha (100 ng/mL), celecoxib (50 ng/mL) and their combination for 90 min. Fluorescence values 480 nm/530 nm reflected concentrations of DNA in cells attached to collagen I. The obtained results indicate that celecoxib (50 ng/mL), the selective COX-2 inhibitor, reduces significantly sICAM-1 and sE-cadherin concentrations in HT-29 and Caco-2 transformed human epithelial colorectal cell line cultures co-treated with IP6 (1.0 mM) and TNF-alpha (100 ng/mL). A decrease of cells adhesion property to collagen I was observed under the influence of 50 ng/mL celecoxib on cell cultures exposed to 1.0 or 2.0 mM IP6 and 1.0 or 2.0 mM IP6 plus 100 ng/mL TNF-alpha.