真核生物翻訳の開始因子EIF1、EIF1A、およびEIF5の調整された動きは、リボソームの前発明複合体による開始コドン認識に応じて、eIF2からリン酸リン酸をトリガーします。

真核生物翻訳前発明複合体（PIC）によるmRNAにおける開始コドンの正確な認識は、適切な遺伝子発現に不可欠です。このプロセスは、40秒のリボソームサブユニットおよび（イニシエーター）tRNA（I）と組み合わせて、真核生物翻訳開始因子（EIF）によって媒介されます。ここでは、PICが8月のコドンに遭遇したときに、以前に開始コドン認識に関係していたEIF1AのC末端尾（CTT）がEIF5のN末端ドメインに近づくという証拠を提供します。重要なことに、この動きは、PICからのeif1の解離と結びついており、開始コドン認識における重要なイベントであり、eIF1A CTTのスキャンエンハンサー要素に依存しています。データはさらに、EIF1解離には、後者をGDP結合状態に変換するEIF2からのリン酸の放出をトリガーするために、EIF1A CTTのEIF5への移動を伴う必要があることを示しています。また、我々の結果は、PICからのeIF1の放出とeIF1AのCTTの動きが同じイベントによって引き起こされることを示唆しています。おそらく、開始コドン間のベースペアリングによって駆動される40秒のサブユニットのP部位におけるtRNA（i）の構成の可能性が最も高いことを示唆しています。mRNAおよびtRNAのアンチコドン（I）。最後に、eIF5のC末端ドメインが、PICへのEIF1結合に拮抗する因子の活動に関与していることを示します。一緒に、私たちのデータは、スキャンの写真がmRNAで8月のスタートコドンに遭遇するときにトリガーされる分子イベントの連鎖のより完全な画像を提供します。

Accurate recognition of the start codon in an mRNA by the eukaryotic translation preinitiation complex (PIC) is essential for proper gene expression. The process is mediated by eukaryotic translation initiation factors (eIFs) in conjunction with the 40 S ribosomal subunit and (initiator) tRNA(i). Here, we provide evidence that the C-terminal tail (CTT) of eIF1A, which we previously implicated in start codon recognition, moves closer to the N-terminal domain of eIF5 when the PIC encounters an AUG codon. Importantly, this movement is coupled to dissociation of eIF1 from the PIC, a critical event in start codon recognition, and is dependent on the scanning enhancer elements in the eIF1A CTT. The data further indicate that eIF1 dissociation must be accompanied by the movement of the eIF1A CTT toward eIF5 in order to trigger release of phosphate from eIF2, which converts the latter to its GDP-bound state. Our results also suggest that release of eIF1 from the PIC and movement of the CTT of eIF1A are triggered by the same event, most likely accommodation of tRNA(i) in the P site of the 40 S subunit driven by base pairing between the start codon in the mRNA and the anticodon in tRNA(i). Finally, we show that the C-terminal domain of eIF5 is responsible for the factor's activity in antagonizing eIF1 binding to the PIC. Together, our data provide a more complete picture of the chain of molecular events that is triggered when the scanning PIC encounters an AUG start codon in the mRNA.