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目的:39.5°Cでの軽度の熱ストレスが、いくつかの細胞タイプのダイサータンパク質とmiRNA発現パターンを変化させたかどうかを調査します。 方法:37°Cから39.5°Cの温度で9時間の間に、複数のヒトおよびマウス細胞タイプを培養しました。Dicer mRNAレベルとマイクロRNAは、Taqman RT-QPCRアッセイとWesternブロッティングによってDicerタンパク質によって定量化されました。 結果:Dicerタンパク質は、RT-QPCRによるDicer mRNAの有意な変化がない場合、39.5°Cでの熱ストレスに応答して、西部分析で大幅に上昇しました。 結論:ダイサー発現の熱誘発性調節は、主に転写後に発生し、ダイサータンパク質の発現レベルが増加し、多くの場合、複数のマウスおよびヒト細胞の発熱範囲の高熱療法に応答して振動します。私たちの研究は、軽度の熱ストレスに対する反応におけるダイサーとマイクロRNAの潜在的な役割を示唆しています。ダイサータンパク質とマイクロRNAのストレス誘発振動に関与するメカニズムに関する追加の研究が興味深いでしょう。
目的:39.5°Cでの軽度の熱ストレスが、いくつかの細胞タイプのダイサータンパク質とmiRNA発現パターンを変化させたかどうかを調査します。 方法:37°Cから39.5°Cの温度で9時間の間に、複数のヒトおよびマウス細胞タイプを培養しました。Dicer mRNAレベルとマイクロRNAは、Taqman RT-QPCRアッセイとWesternブロッティングによってDicerタンパク質によって定量化されました。 結果:Dicerタンパク質は、RT-QPCRによるDicer mRNAの有意な変化がない場合、39.5°Cでの熱ストレスに応答して、西部分析で大幅に上昇しました。 結論:ダイサー発現の熱誘発性調節は、主に転写後に発生し、ダイサータンパク質の発現レベルが増加し、多くの場合、複数のマウスおよびヒト細胞の発熱範囲の高熱療法に応答して振動します。私たちの研究は、軽度の熱ストレスに対する反応におけるダイサーとマイクロRNAの潜在的な役割を示唆しています。ダイサータンパク質とマイクロRNAのストレス誘発振動に関与するメカニズムに関する追加の研究が興味深いでしょう。
PURPOSE: To investigate whether mild heat stress at 39.5°C altered Dicer protein and miRNA expression patterns in several cell types. METHODS: Multiple human and mouse cell types were cultured during the course of 9 h at temperatures from 37°C to 39.5°C. Dicer mRNA levels and microRNAs were quantified by TaqMan RT-qPCR assays and Dicer protein by western blotting. RESULTS: Dicer protein was substantially elevated on western analysis in response to heat stress at 39.5°C in the absence of significant changes in Dicer mRNA by RT-qPCR. CONCLUSIONS: Heat-induced regulation of Dicer expression occurs primarily post- transcriptionally, and the expression levels of Dicer protein are increased and often oscillate in response to fever-range hyperthermia in multiple mouse and human cells. Our studies suggest a potential role for Dicer and microRNAs in the response to mild thermal stress. Additional studies on the mechanisms involved in the stress-induced oscillations of Dicer protein and microRNAs will be of interest.
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