自己免疫性心筋炎のマウスモデルにおける抗炎症療法のために、マウス単球/マクロファージにおけるインターロイキン-10の過剰発現のためのmRNA-ヌクレオフェリションの使用の成功

背景：マウスCD11b（+）単球/マクロファージにおけるインターロイキン-10（IL-10）の過剰発現は、GMPに適応したmRNA-ヌクレオフィクションを介して臨床転帰を改善し、自己免疫性心筋炎の副副作用を軽減すると予想されました。この研究は、自己免疫性心筋炎の治療のためのmRNAヌクレオフェクションによるマウス単球/マクロファージにおけるIL-10の過剰発現を使用した、新規抗炎症療法の原理の証拠を表しています。 方法と結果：トロポニンIによる皮下免疫により、A/Jマウスで自己免疫性心筋炎が誘導されました。CD11b（+）単球/マクロファージは腹膜から分離され、IL-10はmRNA核軟膏によって過剰発現されました。これらの細胞を静脈内注射しました。心筋炎症は、組織学的および免疫組織化学的検査を通じて評価されました。心筋線維症は、マッソンのトリクローム染色で分析されました。アンチトロポニンI抗体は血清内で決定されました。身体能力は、実行中のホイールと心エコー検査を使用して評価されました。CD11b（+）単球/マクロファージにおけるIL-10のin vitro過剰発現により、IL-10の産生が7倍増加しました（n = 3）。in vivoでは、コントロールマウスと比較して処理された心筋内で、IL-10のより高いレベルとより少ない炎症が検出されました（n = 4）。IL-10処理マウスは、より低い抗トロポニンI抗体（n = 10）とより良い身体的性能（n = 10）を示しました。 結論：IL-10過剰発現CD11B（+）単球/マクロファージの適用の適用は、自己免疫性心筋炎のマウスモデルでの炎症を減らし、身体性パフォーマンスを改善しました。したがって、遺伝子組み換え単球/マクロファージの使用は、局所炎症の標的療法を促進し、全身性副作用を減らす可能性があります。ヌクレオフィクション技術はGMPの適応であるため、人間でのin vivoでの使用は基本的に実行可能であるようであり、他の炎症性疾患への移動は可能性が高いようです。

BACKGROUND: Overexpression of interleukin-10 (IL-10) in murine CD11b(+) monocytes/macrophages via GMP-adapted mRNA-nucleofection was expected to improve clinical outcome and reduce adverse side effects in autoimmune myocarditis. This study represents the proof of principle for a novel anti-inflammatory therapy using overexpression of IL-10 in murine monocytes/macrophages by mRNA-nucleofection for the treatment of autoimmune myocarditis. METHODS AND RESULTS: Autoimmune myocarditis was induced in A/J mice by subcutaneous immunization with troponin I. CD11b(+) monocytes/macrophages were isolated from the peritoneum and IL-10 was overexpressed by mRNA-nucleofection. These cells were injected intravenously. Myocardial inflammation was assessed via histological and immunohistochemical examinations. Myocardial fibrosis was analyzed with Masson's trichrome staining. Antitroponin I antibodies were determined within the serum. Physical performance was evaluated using a running wheel and echocardiography. In vitro overexpression of IL-10 in CD11b(+) monocytes/macrophages resulted in a 7-fold increased production of IL-10 (n=3). In vivo higher levels of IL-10 and less inflammation were detected within the myocardium of treated compared with control mice (n=4). IL-10-treated mice showed lower antitroponin I antibodies (n=10) and a better physical performance (n=10). CONCLUSIONS: Application of IL-10-overexpressing CD11b(+) monocytes/macrophages reduced inflammation and improved physical performance in a murine model of autoimmune myocarditis. Thus, the use of genetically modified monocytes/macrophages facilitated a targeted therapy of local inflammation and may reduce systemic side effects. Because the nucleofection technique is GMP adapted, an in vivo use in humans seems basically feasible and the transfer to other inflammatory diseases seems likely.