固相DNA抽出後の血液および唾液特異的マイクロRNAマーカーの定量的PCR分析

体液の同定にmRNAを使用することは、法医学科学に特に興味深いものであり、MicroRNA（miRNA）分析の使用におけるサポートの増加が実証されています。miRNAはmRNAよりも安定しており、体液で微分して発現することが示されています。以前に抽出されたDNAサンプルからのmiRNA分析を含む研究はまだ報告されていません。この実験の目的は、標準のDNA抽出を使用して以前抽出されたサンプルでmiRNA分析を実施できるかどうかを判断することでした。血液および唾液サンプルをDNAおよびRNAキットを使用して抽出し、その後cDNA合成し、その後定量的PCR分析を受けました。ΔCT値の直接的な比較は、血液および唾液特異的マーカーの両方の総RNA抽出とは対照的に、DNA抽出後のmiRNAの存在量が多いことを示しています。上記のマーカーの量を比較することにより、血液特異的マーカーの発現は唾液よりも血液中で高く、唾液特異的マーカーの場合はその逆であることがわかります。得られた結果は、寒冷症例など、サンプルがすでにDNA抽出を受けている症例に大きな影響を与える可能性があります。

The use of mRNA for the identification of body fluids is of particular interest in forensic science, and increasing support has been demonstrated for the use of microRNA (miRNA) analysis. MiRNA is more stable than mRNA and has been shown to be differentially expressed in body fluids. No studies involving miRNA analysis from previously extracted DNA samples have yet been reported. The aim of this experiment was to determine if it was possible to conduct miRNA analysis on samples that were previously extracted using standard DNA extraction. Blood and saliva samples were extracted using DNA and RNA kits, followed by cDNA synthesis, and then underwent quantitative PCR analysis. A direct comparison of ΔCt values shows a larger abundance of miRNA following DNA extraction as opposed to total RNA extraction for both blood- and saliva-specific markers. By carrying out a comparison between the amounts of said markers, it could be seen that the expression of the blood-specific marker was higher in blood than in saliva, and vice versa for the saliva-specific marker. The results obtained could have a profound impact on cases for which the sample has already undergone DNA extraction, such as in cold cases.