CYP11A1の変異を有する7人の患者のさまざまな臨床症状コレステロール鎖切断酵素、P450SCCをコードする

コンテキスト：CYP11A1によってエンコードされたコレステロール側鎖切断酵素P450SCCは、コレステロールをプレグノロンに変換してステロイド産生を開始します。P450SCC欠乏症は、先天性リポイド副腎過形成に似ている副腎およびgonadalステロイド産生を破壊する可能性があります。そのような患者は12人のみが報告されています。 目的：P450SCC欠乏による臨床的および遺伝的経験を拡大しようとしました。 患者と方法：性的発達の障害がない副腎不全の7人の小児の候補遺伝子を配列決定しました。P450SCCミスセンス変異は、F2ベクターで再現され、融合タンパク質P450SCC-フェレドキシン還元酵素フェレドキシンを発現します。COS-1細胞をトランスフェクトし、プレグネノロンの産生をアッセイし、見かけの速度論的パラメーターを計算しました。前述のP450SCC変異体は並行してアッセイされました。 結果：1つの親族の5人のベドウィンの子供のうち4人は、変異c.694c> t（arg232stop）およびc.644t> c（phe215ser）の複合ヘテロ接合体でした。単一ヌクレオチド多型分析により、これらの変異の分離が確認されました。5番目の親族のメンバーと別のベドウィン患者は乳児期に紹介され、Arg232stopのホモ接合性でした。幼児期に存在するフィジー出身の患者は、c.358T> c（arg120stop）のホモ接合体でした。すべての変異は斬新です。F2融合タンパク質でアッセイされたように、P450SCC PHE215SERは野生型活性の2.5％を保持しました。以前に記載されている変異体Leu141TrpとAla269Valは、それぞれ野生型活性の2.6％と12％を有し、VAL415GLUとC.835DELAは検出可能な活性を欠いていました。 結論：妊娠を維持するために必要な胎盤プロゲステロンを生成するにはP450SCCが必要ですが、P450SCCの重度の変異は妊娠期間と互換性があります。より穏やかなP450SCC変異は、性的発達の障害なしに後に現れる可能性があります。肥大した副腎は通常、ステロイド産の急性調節タンパク質欠乏症をP450SCC欠乏症と区別しますが、DNAシーケンスのみが決定的です。

CONTEXT: The cholesterol side-chain cleavage enzyme P450scc, encoded by CYP11A1, converts cholesterol to pregnenolone to initiate steroidogenesis. P450scc deficiency can disrupt adrenal and gonadal steroidogenesis, resembling congenital lipoid adrenal hyperplasia clinically and hormonally; only 12 such patients have been reported previously. OBJECTIVE: We sought to expand clinical and genetic experience with P450scc deficiency. PATIENTS AND METHODS: We sequenced candidate genes in 7 children with adrenal insufficiency who lacked disordered sexual development. P450scc missense mutations were recreated in the F2 vector, which expresses the fusion protein P450scc-Ferredoxin Reductase-Ferredoxin. COS-1 cells were transfected, production of pregnenolone was assayed, and apparent kinetic parameters were calculated. Previously described P450scc mutants were assayed in parallel. RESULTS: Four of five Bedouin children in one kindred were compound heterozygotes for mutations c.694C>T (Arg232Stop) and c.644T>C (Phe215Ser). Single-nucleotide polymorphism analysis confirmed segregation of these mutations. The fifth kindred member and another Bedouin patient presented in infancy and were homozygous for Arg232Stop. A patient from Fiji presenting in infancy was homozygous for c.358T>C (Arg120Stop). All mutations are novel. As assayed in the F2 fusion protein, P450scc Phe215Ser retained 2.5% of wild-type activity; previously described mutants Leu141Trp and Ala269Val had 2.6% and 12% of wild-type activity, respectively, and Val415Glu and c.835delA lacked detectable activity. CONCLUSIONS: Although P450scc is required to produce placental progesterone required to maintain pregnancy, severe mutations in P450scc are compatible with term gestation; milder P450scc mutations may present later without disordered sexual development. Enlarged adrenals usually distinguish steroidogenic acute regulatory protein deficiency from P450scc deficiency, but only DNA sequencing is definitive.