791T/36モノクローナル抗体とそのFAB/CフラグメントのBALB/Cマウスとヌードマウスの生体内分布の比較ヒト腫瘍異種移植片

マウスIgG2Bモノクローナル抗体（MOAB）791T/36のペプシンダイジェストから精製されたFAB/Cフラグメントは、1つのファブアームと無傷のFC部分で構成されています。放射性ヨウ素標識791T/36 MoABおよびそのFAB/CフラグメントのBALB/Cマウスの薬物動態学および生体分布研究は、FC部分の存在により、FAB/Cフラグメントが抗体全体と同じ異化速度を持っていることを示しました（T1/2 = 64時間）。分子量が低いため（105,000）、Fab/Cフラグメントは、血管内皮がゼストロまたは連続している臓器のMoab全体よりも速く、より速く、より速くなりました。肝臓や脾臓などの血管内皮が正弦波である臓器では、それらの拡散能力は同一でした。したがって、FAB/Cフラグメントは、無傷の抗体分子（異化速度の遅い）およびFABまたはF（AB）2フラグメント（血管外拡散の増加）の利点を調整し、固形腫瘍へのターゲティングを改善するために必要な特徴を調整します。皮下791T腫瘍（抗原陽性）およびCOLO205腫瘍（抗原陰性）を持つヌードマウスの生体内分布研究からのデータは、反対側にMOABおよびFAB/Cフラグメント全体の挙動に重要な違いを示しました：（a）MoAB全体が体からより迅速にクリアされました。そして、Fab/Cの断片よりも血から。（b）MoABは、脾臓（実験の3日間の注射後12時間から1を超える組織と血液比）と肝臓（0.6）によって取り上げられましたが、Fab/Cフラグメント組織と血液比のみでした。注射後3日後、脾臓と肝臓のコントロールヌードマウス（0.25および0.28）と比較して、わずかに増加しました（0.34および0.35）。MOABとFAB/Cの両方のフラグメントがFC部分を担うため、これらのデータは、FC部分による抗体の評判の高い「非特異的取り込み」がFCを介した特定の取り込み、たとえば免疫複合体の取り込みである可能性があることを示唆しています。（c）腫瘍と血液の比率は、実験全体で24時間からのMoABおよびFab/Cフラグメントでそれぞれ1.7および1.2でしたが、791T腫瘍の注入用量（IDの％）が存在する/gの割合はいつでもあったのはいつでもありました。MOAB（IDの5％）よりもFAB/Cフラグメント（IDの最大8％）の場合は大きい。これらの結果は、抗体全体と比較して、FAB/Cフラグメントのin vitroでの低免疫反応性を考慮して予想されていませんでした。腫瘍レベルでの抗体全体の分布と異化速度は、標的細胞のそれぞれの原子価と免疫反応性によって調節されることが示唆されています。

Fab/c fragments, purified from pepsin digest of mouse IgG2b monoclonal antibody (MoAb) 791T/36, consist of one Fab arm and the intact Fc portion. Pharmacokinetic and biodistribution studies in BALB/c mice of radioiodine-labeled 791T/36 MoAb and its Fab/c fragments showed that, due to the presence of the Fc portion, the Fab/c fragment has the same catabolic rate as whole antibody (T1/2 = 64 h). Due to its lower molecular weight (105,000), the Fab/c fragment extravasated more quickly and to a greater extent than whole MoAb in organs in which the vascular endothelium was fenestrated or continuous. In organs in which the vascular endothelium is sinusoidal, such as in liver and spleen, their diffusion capacities were identical. Therefore, Fab/c fragments reconcile advantages of the intact antibody molecule (slow catabolic rate) and Fab or F(ab)2 fragments (increased extravascular diffusion), features required to improve targeting to solid tumors. Data from biodistribution studies in nude mice bearing subcutaneous 791T tumor (antigen positive) and Colo205 tumor (antigen negative) contralaterally showed important differences in the behavior of whole MoAb and Fab/c fragment: (a) Whole MoAb was cleared more rapidly from the body and from the blood than Fab/c fragment; (b) The MoAb was taken up by the spleen (tissue to blood ratio greater than 1 from 12 h after injection over the 3 days of the experiment) and the liver (0.6), whereas Fab/c fragment tissue to blood ratios were only slightly increased (0.34 and 0.35) compared to control nude mice (0.25 and 0.28) for the spleen and liver, respectively, 3 days after injection. Since both MoAb and Fab/c fragment bear the Fc portion, these data suggest that the reputed "nonspecific uptake" of antibodies due to the Fc portion could be an Fc-mediated specific uptake, e.g., uptake of immune complexes; (c) The tumor to blood ratios were 1.7 and 1.2 for MoAb and Fab/c fragment, respectively, from 24 h throughout the experiment, whereas the percentage of injected dose (% of ID) present/g of 791T tumor was at any time greater for Fab/c fragment (8% maximum of ID) than for MoAb (5% of ID). These results were not expected in view of the low immunoreactivity in vitro of Fab/c fragments compared to whole antibody. It is suggested that the distribution and the catabolic rate of whole antibody and its Fab/c fragment at the tumor level are modulated by their respective valency and immunoreactivity for the target cell.