繰り返し元素ポリメラーゼ連鎖反応（REP-PCR）に基づいて、ブルガリアのアピアリから分離されたペニバシルス幼虫株の分子タイピング

本研究の目的は、Box A1R、MBO REP1、およびERIC Primersを使用して、繰り返し元素ポリメラーゼ連鎖反応（REP-PCR）を使用して、ブルガリアのアピアリからのPaenibacillus幼虫（P.幼虫）分離株の分子タイピングを実行することでした。ブルガリアのさまざまな地理的地域に位置するアピアリーに由来するアメリカのファウルブルードの臨床症状を持つひなものcombから収集された合計96個の分離株は、参照株NBIMCC 8478およびブルガリア起源の30の市販の蜂蜜サンプルが研究に含まれていました。Rep-PCRフィンガープリント分析により、ひなの櫛と蜂蜜サンプルからのP.幼虫の分離株の2つの遺伝子型ABとABが明らかになりました。遺伝子型AB/ABの組み合わせは、1つの養蜂場と蜂蜜サンプルで検出されました。一般的な遺伝子型ABは、皮のcombs分離株の78.1％と参照株で発見されましたが、遺伝子型ABは分離株の21.9％で決定されました。蜂蜜サンプルの検査により、分析された30のサンプルのうち20のサンプルで実証されたAB遺伝子型の優勢が確認されました。結論として、幼虫の遺伝的疫学は、ブルガリアの株の2つの遺伝子型、ABとABを明らかにしました。P.幼虫の分子タイピングのための開発されたプロトコルは信頼性が高く、感染源を追跡するために使用できます。

The aim of the present study was to perform molecular typing of Paenibacillus larvae (P. larvae) isolates from Bulgarian apiaries with repetitive element polymerase chain reaction (rep-PCR) using BOX A1R, MBO REP1, and ERIC primers. A total of 96 isolates collected from brood combs with clinical symptoms of American foulbrood originating from apiaries located in different geographical regions of Bulgaria, a reference strain P. larvae NBIMCC 8478 and 30 commercial honey samples with Bulgarian origin were included in the study. Rep-PCR fingerprinting analysis revealed two genotypes ab and AB of P. larvae isolates from brood combs and honey samples. A combination of genotypes ab/AB was detected in one apiary and honey sample. The prevailing genotype ab was found in 78.1 % of brood combs isolates as well as in the reference strain whereas genotype AB was determined in 21.9 % of isolates. The examination of honey samples confirmed the preponderance of ab genotype which was demonstrated in 20 of 30 samples analyzed. In conclusion, the genetic epidemiology of P. larvae revealed two genotypes--ab and AB for Bulgarian strains. Developed protocols for molecular typing of P. larvae are reliable and may be used to trace the source of infection.