N-アセチル-L-チェステインは、悪性精巣胚細胞腫瘍におけるブレオマイシン誘発アポトーシスを阻害します

抗酸化物質は、活性酸素種（ROS）を阻害することにより、癌細胞のアポトーシスを予防する可能性があります。しかし、これまでに、ヒト精巣癌（NTERA-2、NT2）細胞におけるブレオマイシン誘導アポトーシスに対する強力な抗酸化N-アセチルシステイン（NAC）の効果を解明する研究は実施されていません。このため、NT2細胞株のアポトーシスシグナル伝達経路に対するブレオマイシンとNAC単独および組み合わせの効果を研究しました。NT2細胞に対するブレオマイシンの細胞毒性効果を決定し、カスパーゼ-3、-8、-9活性、Bcl-2、Bax、Cyt-C、アネキシンV-FTICおよびPIレベルなどのアポトーシスマーカーを異なるNT2細胞で測定しました。エージェント24時間。初期のアポトーシスは、FACSアッセイを使用して決定されました。24、48、および72時間のインキュベーション後、それぞれ400、100、および20 µg/mlのNT2細胞生存率でブレオマイシンの致死量（LD50）の半分を発見しました。ブレオマイシン（LD50）およびH2O2と24時間インキュベートすると、カスパーゼ-3、-8、-9活性、CYT-CおよびBAXレベルが増加し、BCL-2レベルが低下しました。ブレオマイシン/H2O2およびNAC（5 mM）と24時間のNT2細胞の同時インキュベーションは、カスパーゼ-3、-8、-9活性、BAXおよびCYT-Cレベルおよびブレオマイシン/H2O2依存性のブレオマイシン/H2O2依存性の増加を廃止しました。Bcl-2レベルの低下。我々の結果は、ブレオマイシン/H2O2がアポトーシスのミトコンドリア経路を活性化することによりNT2細胞のアポトーシスを誘導し、NACはブレオマイシン/H2O2誘導アポトーシスを減少させることを示しています。NACは、NT2細胞におけるブレオマイシン誘発アポトーシスに拮抗的な効果があり、癌細胞の除去に望ましい効果ではないアポトーシスに対する耐性を引き起こすと結論付けています。

Antioxidants may prevent apoptosis of cancer cells via inhibiting reactive oxygen species (ROS). However, to date no study has been carried out to elucidate the effects of strong antioxidant N-acetylcysteine (NAC) on Bleomycin induced apoptosis in human testicular cancer (NTERA-2, NT2) cells. For this reason, we studied the effects of Bleomycin and NAC alone and in combination on apoptotic signaling pathways in NT2 cell line. We determined the cytotoxic effect of bleomycin on NT2 cells and measured apoptosis markers such as Caspase-3, -8, -9 activities and Bcl-2, Bax, Cyt-c, Annexin V-FTIC and PI levels in NT2 cells incubated with different agents for 24 h. Early apoptosis was determined using FACS assay. We found half of the lethal dose (LD50) of Bleomycin on NT2 cell viability as 400, 100, and 20 µg/ml after incubations for 24, 48, and 72 h, respectively. Incubation with bleomycin (LD50 ) and H2O2 for 24 h increased Caspase-3, -8, -9 activities, Cyt-c and Bax levels and decreased Bcl-2 levels. The concurrent incubation of NT2 cells with bleomycin/H2O2 and NAC (5 mM) for 24 h abolished bleomycin/H2O2-dependent increases in Caspase-3, -8, -9 activities, Bax and Cyt-c levels and bleomycin/H2O2-dependent decrease in Bcl-2 level. Our results indicate that bleomycin/H2O2 induce apoptosis in NT2 cells by activating mitochondrial pathway of apoptosis, while NAC diminishes bleomycin/H2O2 induced apoptosis. We conclude that NAC has antagonistic effects on Bleomycin-induced apoptosis in NT2 cells and causes resistance to apoptosis which is not a desired effect in eliminating cancer cells.