RS6166の多型とFSH受容体転写産物バリアントおよびヒト顆粒膜細胞培養におけるステロイド産生の関連

卵胞刺激ホルモン受容体（FSHR）2039 A> G（RS6166、P.ASN680SER）の遺伝的変異は、卵巣感受性の測定とゴナドトロピン刺激の結果に対応することが繰り返し示されました。しかし、これまでに、観察された関連付けの背後にあるメカニズムを明らかにする研究はありませんでした。本研究の目的は、FSHR転写産物のバリエーション（エクソン2、6、および9および挿入の削除）に特に関連して、LHCGR、CYP19A1、FSHR自体などのFSHR依存性遺伝子のRS6166とmRNA発現の関係を調査することでした。細胞培養モデルのエクソン8と9の間の新しいエクソンの。ステロイド産生とFSHR遺伝子型への依存も評価されました。IVF治療を受けている合計22人の正常侵害患者が募集されました。顆粒膜細胞は卵巣穿刺により得られ、ゴナドトロピンを含まない培地でFSHに対する反応性を回復するために7日間培養しました。0.5 UI/L RHFSHを使用して、血清枯渇環境で刺激を24時間実行しました。遺伝子発現はリアルタイムPCRによって評価され、遺伝子型は対立遺伝子特異的PCRによって決定されました。P.ASN680SER遺伝子型の分布は次のとおりでした：10ホモ接合体ASN/ASN、8ヘテロ接合体ASN/Ser、および4ホモ接合体Ser/Ser。研究されたすべてのサンプルでの総FSHRの発現は、刺激時に1.9（95％CI：0.39-11.53、p <0.001）の平均因子（95％CI：0.39-11.53、p <0.001）によって増加しました。分析されたFSHR転写産物バリアントはすべて、刺激性および刺激された細胞で検出可能でした。アップレギュレーションに続いた唯一の異なる転写産物は、エクソン2の欠失でした。ホモ接合体ASN/ASNは、SER/SER遺伝子型のキャリアと比較して、FSHRのRHFSH誘発性発現が高い傾向がありました。LHCGRとCYP19A1の相対的な発現は、上方制御されていますが、FSHR遺伝子型に関して有意な差は示されませんでした。独自のリガンドによるFSHR発現の可変変調は、FSHR遺伝子変異体を有する患者の異なる臨床行動を説明する可能性があります。RS6166の推定上の貢献には、さらなる調査が必要です。

Follicle stimulating hormone receptor (FSHR) genetic variation at position 2039 A > G (rs6166, p.Asn680Ser) was repetitively shown to correspond to the measures of ovarian sensitivity and the outcomes of gonadotropin stimulation. However, to date, there has been no study revealing the mechanisms behind the associations observed. The aim of the present research was to investigate the relationship between rs6166 and mRNA expression of FSHR-dependent genes such as LHCGR, CYP19A1, and FSHR itself with particular reference to the FSHR transcript variants (deletions of exon 2, 6, and 9 and insertion of a novel exon between exons 8 and 9) in the cell culture model. Steroid production and its dependency on FSHR genotype were also assessed. A total of 22 normoovulatory patients undergoing IVF treatment were recruited. Granulosa cells were obtained by ovary puncture and cultured for 7 days to regain responsiveness to FSH in a gonadotropin-free medium. Stimulation was carried out for 24 hours in a serum-depleted environment using 0.5 UI/l rhFSH. Gene expression was assessed by real-time PCR and genotype was determined by allele-specific PCR. The distribution of p.Asn680Ser genotypes was as follows: 10 homozygotes Asn/Asn, 8 heterozygotes Asn/Ser, and 4 homozygotes Ser/Ser. Expression of total FSHR in all samples studied increased by a mean factor of 1.9 (95% CI: 0.39-11.53, p < 0.001) upon stimulation. All of the analyzed FSHR transcript variants were detectable in non-stimulated and stimulated cells. The only distinct transcript that followed up-regulation was deletion of exon 2. Homozygotes Asn/Asn tended to have higher rhFSH-induced expression of FSHR as compared to the carriers of Ser/Ser genotype. Relative expression of LHCGR and CYP19A1 although up-regulated showed no significant difference with respect to the FSHR genotype. Variable modulation of FSHR expression by its own ligand is likely to explain different clinical behavior of patients with FSHR genetic variants. The putative contribution of rs6166 requires further investigation.