全血中の亜鉛プロトポルフィリンIXおよびプロトポルフィリンIXの蛍光ベースの定量化のための二重波長励起

赤血球亜鉛プロトポルフィリンIX（ZNPP）およびプロトポルフィリンIX（PPIX）の定量化は、個別または共同で、鉄欠乏、鉄制限の赤血球機能、鉛曝露、およびポルフィアリアの診断評価に役立ちます。洗われていない血液サンプルにおけるZNPPとPPIXの同時定量化の方法が説明されており、二重波長励起を使用して、他の血成分からの背景蛍光を効果的に排除します。35人の被験者の血液サンプルでは、二重波長励起法と参照高性能液体クロマトグラフィー（HPLC）アッセイの結果は、ZNPP（RS = 0.943、P <0.0001;範囲37-689μmolZNPP/molの両方で密接に相関していました。ヘム、84-1238 nmol/l）およびPPIX（rs = 0.959、p <0.0001;範囲42-4212μmolppix/mol heme、93-5394 nmol/l）。さらに、ZNPPの場合、提案された方法は、従来の単一波長励起と、洗浄された赤血球および全血の市販の前面蛍光測定と比較されます。二重波長励起蛍光測定が、ZNPPおよびPPIXの血液および組織測定のバックグラウンド蛍光の抑制に対する新しいアプローチを提供すると仮定します。

Quantification of erythrocyte zinc protoporphyrin IX (ZnPP) and protoporphyrin IX (PPIX), individually or jointly, is useful for the diagnostic evaluation of iron deficiency, iron-restricted erythropoiesis, lead exposure, and porphyrias. A method for simultaneous quantification of ZnPP and PPIX in unwashed blood samples is described, using dual-wavelength excitation to effectively eliminate background fluorescence from other blood constituents. In blood samples from 35 subjects, the results of the dual-wavelength excitation method and a reference high performance liquid chromatography (HPLC) assay were closely correlated both for ZnPP (rs = 0.943, p < 0.0001; range 37-689 μmol ZnPP/mol heme, 84-1238 nmol/L) and for PPIX (rs = 0.959, p < 0.0001; range 42-4212 μmol PPIX/mol heme, 93-5394 nmol/L). In addition, for ZnPP, the proposed method is compared with conventional single-wavelength excitation and with commercial front-face fluorimetry of washed erythrocytes and whole blood. We hypothesize that dual-wavelength excitation fluorimetry will provide a new approach to the suppression of background fluorescence in blood and tissue measurements of ZnPP and PPIX.