Nijmegen破損症候群：変異体ニブリンタンパク質のクリアランス経路は対立遺伝子特異的です

常染色体劣性障害Nijmegen破裂症候群（NBS）は、タンパク質ニブリン（NBS1; P95）をコードするNBN遺伝子の変異によって引き起こされます。ほとんどの場合、5bpの削除である創設者の突然変異は、翻訳の代替開始後に、低変動70kDタンパク質、p70-ニブリンにつながります。タンパク質レベルは、特に悪性腫瘍に関して、疾患の臨床経過に関連しています。ここでは、これらがニブリンの存在量に影響を与えるかどうかを確立するために、変異タンパク質クリアランスのメカニズムと効率を調べました。NBS患者およびレトロウイルス産業の細胞株は、プロテアソームおよびリソソーム阻害剤で治療され、p70-ニブリンおよびp95-ニブリンレベルの半定量的免疫ブロッティングによって検査されました。結果は、P70-ニブリンが、この部分的に活性なタンパク質フラグメントのより低いまたはより高い定常状態レベルにつながるさまざまなNBS患者の細胞株のさまざまな効率でプロテアソームによって分解されていることを示しています。対照的に、トリプトファンによる重要なアルギニンの置換によりタンパク質の折り畳みを乱す以前に記載されたNBNミスセンス変異は、リソソーム微小自動療法によってもより低い細胞レベルにつながるリソソーム微小自動療法によって除去されることがわかった。データは、切り捨てられたニブリンと誤って折り畳まれたニブリンが異なるクリアランス経路を持っていることを示しています。

The autosomal recessive disorder Nijmegen breakage syndrome (NBS) is caused by mutations in the NBN gene which codes for the protein nibrin (NBS1; p95). In the majority of cases, a 5bp deletion, a founder mutation, leads to a hypomorphic 70kD protein, p70-nibrin, after alternative initiation of translation. Protein levels are of relevance for the clinical course of the disease, particularly with regard to malignancy. Here, mechanisms and efficiency of mutant protein clearance were examined in order to establish whether these have an impact on nibrin abundance. Cell lines from NBS patients and retroviral transductants were treated with proteasome and lysosome inhibitors and examined by semi-quantitative immunoblotting for p70-nibrin and p95-nibrin levels. The results show that p70-nibrin is degraded by the proteasome with varying efficiency in cell lines from different NBS patients leading to lower or higher steady state levels of this partially active protein fragment. In contrast, a previously described NBN missense mutation, which disturbs protein folding due to the substitution of a critical arginine by tryptophan, was found to be cleared by lysosomal microautophagy leading also to lower cellular levels. The data show that truncated nibrin and misfolded nibrin have different clearance pathways.