アンジオテンシンII注入アポリポタンパク質-E（APOE-/ - ）ノックアウトマウスにおけるカベオリン-1によるアセチルコリン誘発性内皮依存性大動脈弛緩障害

目的：アンジオテンシンII（ANGII）注入されたアポリポタンパク質E-欠損（APOE（ - / - ））マウスモデルは、アテローム性動脈硬化症および腹部大動脈瘤の研究に広く使用されています。このモデルでは、血圧の増加が報告されていますが、根本的なメカニズムは完全に調査されていません。この研究では、血管運動機能障害がANGII注入APOE（ - / - ）マウスで発生するかどうか、および関与する根本的なメカニズムを調査しました。 方法：APOE（ - / - ）マウスに、14日間皮下に車両（蒸留水）またはANGIを注入しました。血圧と心拍数は、非侵襲的な尾のカフ法を使用して測定されました。大動脈血管反応性と重要なタンパク質の発現（内皮一酸化窒素シンターゼ（ENOS）、ホスホエノ、カベオリン-1）は、それぞれ張力の筋肉造影とウエスタンブロッティングを使用して評価されました。血漿一酸化窒素（NO）レベルは、比色アッセイを使用して推定されました。 結果：ANGII注入により、血圧が時間依存して増加しました（P <0.001）。ANGII注入マウスの大動脈は、ビヒクルコントロールを注入したマウスの大動脈と比較した場合、アセチルコリン誘発内皮依存性弛緩に対する反応性が著しく低かった（P <0.05）。ANGII注入マウスの大動脈では、フェニレフリン（P <0.01）および塩化カリウム（P <0.001）に対する収縮反応が大幅に増強されました。ANGII注入マウスの大動脈では、ENOSリン酸化が有意に減少しました（P <0.05）。ANGII注入マウスでは、大動脈カベオリン-1タンパク質の発現が有意に増加しました（P <0.05）。血漿硝酸塩/亜硝酸塩レベルは、ANGII注入マウスで有意に減少しました（P <0.05）。ANGII注入マウスからの分離された大動脈におけるメチル-β-シクロデキストリン（MβCD）を使用したカベオラの薬理学的破壊により、ビヒクルコントロールと比較した場合、アセチルコリン誘発弛緩弛緩濃度応答曲線の有意な左へのシフトが生じました（P <0.05）。 結論：カベオリン-1タンパク質発現のアップレギュレーションとバイオアベイラビリティの低下は、ANGII注入APOE（ - / - ）マウスの大動脈内皮機能障害に寄与します。

OBJECTIVE: The angiotensin II (AngII)-infused apolipoprotein E-deficient (ApoE(-/-)) mouse model is widely used to study atherosclerosis and abdominal aortic aneurysm. An increase in blood pressure has been reported in this model however the underlying mechanism has not been fully explored. In this study, we investigated whether vasomotor dysfunction develops in AngII-infused ApoE(-/-) mice and the underlying mechanism involved. METHODS: ApoE(-/-) mice were infused with vehicle (distilled water) or AngII subcutaneously for 14 days. Blood pressure and heart rate were measured using the non-invasive tail cuff method. Aortic vascular reactivity and expression of key proteins (endothelial nitric oxide synthase (eNOS), phospho-eNOS and caveolin-1) were assessed using tension myography and Western blotting respectively. Plasma nitric oxide (NO) level was estimated using a colorimetric assay. RESULTS: AngII infusion caused a time-dependent increase in blood pressure (P<0.001). Aortas from AngII-infused mice were significantly less responsive to acetylcholine-induced endothelium-dependent relaxation when compared to aortas from mice infused with vehicle control (P<0.05). Contractile responses to phenylephrine (P<0.01) and potassium chloride (P<0.001) were significantly enhanced in aortas from AngII-infused mice. eNOS phosphorylation was significantly decreased in the aorta of AngII-infused mice (P<0.05). Aortic caveolin-1 protein expression was significantly increased in AngII-infused mice (P<0.05). Plasma nitrate/nitrite level was significantly reduced in AngII-infused mice (P<0.05). Pharmacological disruption of caveolae using methyl-β-cyclodextrin (MβCD) in isolated aortas from AngII-infused mice caused a significant leftward shift of the acetylcholine-induced relaxation concentration-response curve when compared to vehicle control (P<0.05). CONCLUSION: Upregulation of caveolin-1 protein expression and reduced NO bioavailability contributes to aortic endothelial dysfunction in AngII-infused ApoE(-/-) mice.