DNF-YBは、ショウジョウバエの眼の発達中に細胞死と細胞分化において二重の役割を果たします

核転写因子Y（NF-Y）は、真核生物でよく特徴付けられています。これは、NF-Ya、NF-YB、およびNF-Cycの3つの異なるサブユニットで構成されており、そのすべてがNF-Y複合体とDNA結合の形成に必要です。特にヒストン倍モチーフ（HFM）（95％アイデンティティと100％の類似性）で、アイデンティティが75％、全体として95％の類似性を持つショウジョウバエ種の間では、NF-YBに高い相同性があります。本研究では、目の想像上の椎間板におけるショウジョウバエNF-YB（DNF-YB）の特定のノックダウンが成人に粗い眼の表現型を誘発し、この表現型はカスパーゼ依存性アポトーシスの誘導に続いてアポトーシス誘発性増殖の結果である。さらに、ノックダウンは、アポトーシス機能とは無関係に、R7光受容体細胞分化を特異的に阻害しました。DNF-YBとDNF-YAは、実際にはin vivoで複合体を形成し、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（MAPK）経路を減少させることにより、R7光受容体細胞分化を損なう。MAPKカスケードの下流成分であるSEV遺伝子またはD-RAF遺伝子の発現は、DNF-YBノックダウンハエの粗い目の表現型とR7シグナルの喪失を救うことができます。死亡者Bcl-2（DEBCL）は、ショウジョウバエMelanogasterのBcl-2のホモログであり、そのプロモーターには、プロモーター活性においてポジティブな役割を果たす4つのDNF-Y結合コンセンサスシーケンスが含まれています。抗DNF-YB抗体およびS2細胞を使用したクロマチン免疫沈降アッセイでは、NF-Yコンセンサスを含むDEBCL遺伝子プロモーター領域は、ポリメラーゼ連鎖反応による免疫沈降物で効果的に増幅されました。まとめると、これらの結果は、DNF-YがDEBCL遺伝子発現を調節することを示しています。

Nuclear transcription factor Y (NF-Y) is well characterized in eukaryotes. It consists of three different subunits, NF-YA, NF-YB and NF-YC, all of which are required for formation of the NF-Y complex and DNA-binding. There is a high homology in NF-YB among Drosophila species with 75% identity and 95% similarity overall, especially in the histone-fold motif (HFM) (95% identity and 100% similarity). In the present study, specific knockdown of Drosophila NF-YB (dNF-YB) in eye imaginal discs induced a rough eye phenotype in adults and this phenotype was the result of induction of caspase-dependent apoptosis followed by apoptosis-induced proliferation. Furthermore, knockdown specifically inhibited R7 photoreceptor cell differentiation, independent of the apoptotic function. dNF-YB and dNF-YA indeed form complexes in vivo where they impair R7 photoreceptor cell differentiation by down regulating the mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway. Expression of the sev gene, or the D-raf gene, a downstream component of the MAPK cascade, could rescue the rough eye phenotype and the loss of R7 signals in dNF-YB knockdown flies. The death executioner Bcl-2 (debcl) is the homolog of Bcl-2 in Drosophila melanogaster and its promoter contains four dNF-Y-binding consensus sequences which play positive roles in promoter activity. In chromatin immunoprecipitation assays with anti-dNF-YB antibody and S2 cells, the debcl gene promoter region containing the NF-Y consensus was effectively amplified in immunoprecipitates by polymerase chain reaction. Taken together, these results indicate that dNF-Y regulates debcl gene expression.