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目的:カロテノイド産生が乳酸酸細菌のストレス耐性を改善するかどうかを判断するために、クローン化された腸球菌カロテノイド生合成遺伝子が乳酸腫菌SSPで発現しました。クレモリスMG1363、およびストレス条件下でのカロテノイド産卵操作MG1363株の生存率を調査しました。 方法と結果:黄色の染色エンテロコッカスギルバスのカロテノイド生合成遺伝子をクローン化しました。クローン化された遺伝子はCRTNとCRTMで構成され、そのプロモーター領域はシャトルベクターPRH100に挿入され、得られたプラスミドはPRCと名付けられました。クローン化されたCRTNMは、非カロテノイド産生L. lactis SSPでPRCを使用して発現しました。Cremoris MG1363。CRTNMの発現は、C30カロテノイド4,4'-ジアポネロスポレンの産生をもたらしました。32 mmol L(-1)H2 O2、低pH(1.5、HClで酸性化)、20%胆汁酸、および12 mg ml(-1)リゾチームへの曝露後、MG1363株の生存率は、それぞれMG1363のharbedよりも高かった。 結論:ENTからのカロテノイド生合成遺伝子の発現。Gilvusは、L。Lactisのマルチストレス耐性を改善します。 研究の重要性と影響:カロテノイド産生のための遺伝子の導入による乳酸酸細菌のマルチストレス耐性の改善の最初の報告。
目的:カロテノイド産生が乳酸酸細菌のストレス耐性を改善するかどうかを判断するために、クローン化された腸球菌カロテノイド生合成遺伝子が乳酸腫菌SSPで発現しました。クレモリスMG1363、およびストレス条件下でのカロテノイド産卵操作MG1363株の生存率を調査しました。 方法と結果:黄色の染色エンテロコッカスギルバスのカロテノイド生合成遺伝子をクローン化しました。クローン化された遺伝子はCRTNとCRTMで構成され、そのプロモーター領域はシャトルベクターPRH100に挿入され、得られたプラスミドはPRCと名付けられました。クローン化されたCRTNMは、非カロテノイド産生L. lactis SSPでPRCを使用して発現しました。Cremoris MG1363。CRTNMの発現は、C30カロテノイド4,4'-ジアポネロスポレンの産生をもたらしました。32 mmol L(-1)H2 O2、低pH(1.5、HClで酸性化)、20%胆汁酸、および12 mg ml(-1)リゾチームへの曝露後、MG1363株の生存率は、それぞれMG1363のharbedよりも高かった。 結論:ENTからのカロテノイド生合成遺伝子の発現。Gilvusは、L。Lactisのマルチストレス耐性を改善します。 研究の重要性と影響:カロテノイド産生のための遺伝子の導入による乳酸酸細菌のマルチストレス耐性の改善の最初の報告。
AIMS: To determine whether the carotenoid production improves stress tolerance of lactic acid bacteria, the cloned enterococcal carotenoid biosynthesis genes were expressed in Lactococcus lactis ssp. cremoris MG1363, and the survival rate of carotenoid-producing engineered MG1363 strain under stress condition was investigated. METHODS AND RESULTS: We cloned carotenoid biosynthesis genes from yellow-pigmented Enterococcus gilvus. The cloned genes consisted of crtN and crtM and its promoter region were inserted into the shuttle vector pRH100, and the resulting plasmid was named pRC. The cloned crtNM was expressed using pRC in noncarotenoid-producing L. lactis ssp. cremoris MG1363. The expression of crtNM led to the production of C30 carotenoid 4,4'-diaponeurosporene. After exposure to 32 mmol l(-1) H2 O2 , low pH (1.5, acidified with HCl), 20% bile acid and 12 mg ml(-1) lysozyme, the survival rates of the MG1363 strain harbouring pRC were 18.7-, 6.8-, 8.8- and 4.4-fold higher, respectively, than those of MG1363 strain harbouring the empty vector pRH100. CONCLUSIONS: The expression of carotenoid biosynthesis genes from Ent. gilvus improves the multistress tolerance of L. lactis. SIGNIFICANCE AND IMPACT OF THE STUDY: First report of the improvement of multistress tolerance of lactic acid bacteria by the introduction of genes for carotenoid production.
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