ヒト皮膚の同等物における皮膚および表皮の形態形成に対する連続した継続的な線維芽細胞の効果

連続継代は、一次細胞に大きな影響を及ぼします。連続した継続細胞は細胞老化の兆候を示すため、シリアル継代は老化のin vitroモデルとして使用されます。in vitro老化の効果をin vivoの老化に関連付けるために、ヒト皮膚の等価物（HSE）を生成しました。後期通過線維芽細胞で生成されたHSEが、早期の通過線維芽細胞で生成されたHSEと比較した場合、老化した皮膚の特性を示すかどうかを調査しました。後期通過線維芽細胞は細胞体を拡大し、筋線維芽細胞マーカーα-スムース筋アクチン、老化関連β-ガラクトシダーゼ、およびP16の初期の継代線維芽細胞と比較してより頻繁に陽性でした。後期通過線維芽細胞で生成された皮膚同等物には、薄い真皮があり、これはマトリックスメタロプロテイナーゼ-1分泌の増加によって部分的に説明できます。ケラチン6の後期通過線維芽細胞で生成された同等物では、発現が増加し、ケラチン10の表皮発現がわずかに減少しました。しかし、表皮の増殖、表皮の厚さ、基底膜形成は影響を受けませんでした。結論として、早期通過線維芽細胞で生成されたHSEと比較して、後期通過線維芽細胞で生成されたHSEは真皮の変化を示したが、基底膜と表皮の変化はないか、最小限の変化を示した。

Serial passaging has a profound effect on primary cells. Since serially passaged cells show signs of cellular aging, serial passaging is used as an in vitro model of aging. To relate the effect of in vitro aging more to in vivo aging, we generated human skin equivalents (HSEs). We investigated if HSEs generated with late passage fibroblasts show characteristics of aged skin when compared with HSEs generated with early passage fibroblasts. Late passage fibroblasts had enlarged cell bodies and were more often positive for myofibroblast marker α-smooth muscle actin, senescence associated β-galactosidase and p16 compared with early passage fibroblasts. Skin equivalents generated with late passage fibroblasts had a thinner dermis, which could partly be explained by increased matrix metalloproteinase-1 secretion. In equivalents generated with late passage fibroblasts epidermal expression of keratin 6 was increased, and of keratin 10 slightly decreased. However, epidermal proliferation, epidermal thickness and basement membrane formation were not affected. In conclusion, compared with HSEs generated with early passage fibroblasts, HSEs generated with late passage fibroblasts showed changes in the dermis, but no or minimal changes in the basement membrane and the epidermis.