細胞毒性Tリンパ球/標的細胞シナプスでの微小管組織化中心分極化に先行する溶解顆粒分泌の初期および迅速なステップは

現在、細胞毒性Tリンパ球（CTLS）による致死ヒット送達は、標的細胞への中心体分極に機械的に関連しており、限られた分泌ドメイン内の溶解顆粒の専用放出につながると想定されています。ここでは、このメカニズムが致命的なヒット配信の一般的なパラダイムとして適用されない可能性があることを示す3つの証拠を提供します。第一に、固定化されたペプチド-MHC複合体で刺激されたCTLSでは、溶菌顆粒と微小管組織化中心局在化がシナプス領域への局在化が、全体的な内部反射蛍光顕微鏡で検出されるように、時空間的に解離します。第二に、多くのCTL/標的細胞のコンジュゲートで、溶解顆粒分泌は微小管偏光に先行し、細胞細胞接触後の最初の1分間に検出できます。第三に、微小管組織化中心と中心体分極の阻害は、CTLシナプスでの溶解顆粒放出も、効率を殺すことも損なうことはありません。我々の結果は、溶解顆粒分泌の非常に迅速なステップを明らかにし、微小管の組織化中心分極が効率的な致命的なヒット送達に不可欠であることを示すことにより、CTL生物学の現在の見解を広げます。

It is presently assumed that lethal hit delivery by cytotoxic T lymphocytes (CTLs) is mechanistically linked to centrosome polarization toward target cells, leading to dedicated release of lytic granules within a confined secretory domain. Here we provide three lines of evidence showing that this mechanism might not apply as a general paradigm for lethal hit delivery. First, in CTLs stimulated with immobilized peptide-MHC complexes, lytic granules and microtubule organizing center localization into synaptic areas are spatio-temporally dissociated, as detected by total internal reflection fluorescence microscopy. Second, in many CTL/target cell conjugates, lytic granule secretion precedes microtubule polarization and can be detected during the first minute after cell-cell contact. Third, inhibition of microtubule organizing center and centrosome polarization impairs neither lytic granule release at the CTL synapse nor killing efficiency. Our results broaden current views of CTL biology by revealing an extremely rapid step of lytic granule secretion and by showing that microtubule organizing center polarization is dispensable for efficient lethal hit delivery.