心筋梗塞後の心臓トロポニンtの時間依存性分解パターン

背景：心臓トロポニンT（CTNT）は、急性心筋梗塞（AMI）の診断に広く使用されています。しかし、劣化したCTNT形態が患者の血液中に循環するかどうかはまだ不明です。したがって、臨床アッセイによってどのCTNTフォームが検出されるかを解明することを目的としました。 方法：GELろ過クロマトグラフィー（GFC）によるCTNT型の分離は、CTNT分解を調べるために13人のAMI患者の血清で実施されました。GFC溶出物は、臨床CTNTアッセイを模倣するために使用されたRoche ImmunoAssayの元の抗体を使用したウエスタンブロット分析を受けました。時間とともに分解パターンを調査するために、入院後0〜72時間後に収集された18人のAMI患者の標準化された血清サンプルをウエスタンブロット分析によって分析しました。 結果：AMI患者の血清のGFC分析により、保持量が5および21 mLの2つのCTNTピークが明らかになりました。ウエスタンブロット分析により、これらのピークはそれぞれ29 kDaと14-18 kDaのCTNTフラグメントとして識別されました。さらに、標準化された血清サンプルでの直接ウエスタンブロットの性能は、14〜40 kDaの範囲のフラグメントで、CTNTの時間依存分解パターンを示しました。無傷のCTNT（40 kDa）は、入院後最初の8時間以内に3人の患者のみに存在していました。 結論：これらの結果は、Roche CTNT免疫測定法が、診断テスト期間中にAMI患者の血清で無傷のCTNT型を検出し、劣化したCTNT型を検出することを示しています。さらに、AMIに続いて、CTNTは時間依存パターンで分解されます。

BACKGROUND: Cardiac troponin T (cTnT) is widely used for the diagnosis of acute myocardial infarction (AMI). However, it is still unclear whether degraded cTnT forms circulate in the patient's blood. We therefore aimed to elucidate which cTnT forms are detected by the clinical assay. METHODS: Separation of cTnT forms by gel filtration chromatography (GFC) was performed in sera from 13 AMI patients to examine cTnT degradation. The GFC eluates were subjected to Western blot analysis with the original antibodies from the Roche immunoassay used to mimic the clinical cTnT assay. To investigate the degradation pattern with time, standardized serum samples of 18 AMI patients collected 0-72 h after admission were analyzed by Western blot analysis. RESULTS: GFC analysis of AMI patients' sera revealed 2 cTnT peaks with retention volumes of 5 and 21 mL. Western blot analysis identified these peaks as cTnT fragments of 29 and 14-18 kDa, respectively. Furthermore, the performance of direct Western blots on standardized serum samples demonstrated a time-dependent degradation pattern of cTnT, with fragments ranging between 14 and 40 kDa. Intact cTnT (40 kDa) was present in only 3 patients within the first 8 h after hospital admission. CONCLUSIONS: These results demonstrate that the Roche cTnT immunoassay detects intact as well as degraded cTnT forms in AMI patients' sera during the period of diagnostic testing. Moreover, following AMI, cTnT is degraded in a time-dependent pattern.