レニン - アンジオテンシン系の活性化は、アポリポタンパク質EノックアウトマウスおよびHK-2細胞における脂質異常症媒介腎損傷に関与しています

背景：レニン - アンジオテンシン系（RAS）の脂質異常症と活性化は、慢性腎疾患（CKD）の進行に寄与します。この研究では、腎損傷における高脂血症による腎内RAS活性化の相乗効果の可能性を調査しました。 方法：アポリポタンパク質ノックアウトマウスに、8週間、通常のチョウダイエット（コントロール）または高脂肪食（HFグループ）を与えました。ヒト近位尿細管上皮細胞株（HK-2）を（コントロール）またはコレステロール（30μg/ml）、25-ヒドロキシコレステロール（1μg/ml）（脂質群）（脂質基）なしで24時間処理しました。プラズマ脂質プロファイルとRAS成分は、それぞれ臨床生化学アッセイとRadiOmmunoAssayによって決定されました。腎臓へのコラーゲン沈着は、マッソン染色によって評価されました。上皮間葉系遷移（EMT）のRas成分とバイオマーカーに関与する分子の遺伝子およびタンパク質発現を、リアルタイムPCR、免疫化学染色、およびウエスタンブロットで調べました。 結果：高脂肪食を与えられたマウスは、コントロールと比較して腎尿細管間質におけるコラーゲン沈着を伴う重大な高脂血症を示しました。レニン、アンジオテンシンI、およびアンジオテンシンIIの血漿レベルは、2つのグループで違いはありませんでした。しかし、HFグループの腎臓は、トリグリセリド、総コレステロール、およびLDLの血漿レベルの増加と正に関連していた上方制御されたRAS成分を示しました。これらの効果は、in vitro研究によってさらに確認されました。脂質負荷誘導HK-2細胞はEMTを受けました。これは、細胞内RAS成分の発現の増加と密接に関連していました。 結論：局所RAS活性化は高脂血症媒介腎損傷に関与しており、CKDの進行を促進する高脂血症によるRAS活性化に起因する相乗効果があることを示唆しています。

BACKGROUND: Dyslipidemia and activation of renin-angiotensin system (RAS) contribute to the progression of chronic kidney disease (CKD). This study investigated possible synergistic effects of intrarenal RAS activation with hyperlipidemia in renal injuries. METHODS: Apolipoprotein knockout mice were fed with normal chow diet (control) or high fat diet (HF group) for eight weeks. Human proximal tubular epithelial cell line (HK-2) was treated without (control) or with cholesterol (30 μg/ml) plus 25-hydroxycholesterol (1 μg/ml) (lipid group) for 24 hours. The plasma lipid profile and RAS components were determined by clinical biochemistry assay and radiommunoassay, respectively. Collagen deposition in kidneys was evaluated by Masson-staining. The gene and protein expressions of molecules involved in RAS components and biomarkers of epithelial mesenchymal transition (EMT) were examined by real-time PCR, immunochemical staining, and Western blot. RESULTS: The mice fed with high-fat diet showed significant hyperlipidemia with collagen deposition in renal tubular interstitium compared to controls. The plasma levels of renin, angiotensin I, and angiotensin II were no difference in two groups. However, the kidneys of HF group showed up-regulated RAS components, which were positively associated with increased plasma levels of triglyceride, total cholesterol, and LDL. These effects were further confirmed by in vitro studies. Lipid loading induced HK-2 cells underwent EMT, which was closely associated with the increased expressions of intracellular RAS components. CONCLUSIONS: Local RAS activation was involved in hyperlipidemia-mediated renal injuries, suggesting that there are synergistic effects resulting from RAS activation with hyperlipidemia that accelerates the progression of CKD.