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Transfusion medicine (Oxford, England)2013Jun01Vol.23issue(3)

抗Dと抗HBFを使用したフローサイトメトリーによる異常な母体血液サンプルにおける胎児の出血およびF細胞の定量

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文献タイプ:
  • Comparative Study
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

背景:Kleihauer-Betkeテスト(KBT)による胎児の出血(FMH)評価は迅速ですが、半定量的であり、誤った肯定的な結果に対して責任を負います。 目的:大規模なFMH、産科リスク要因、または技術的な問題を抱える37人の患者のフローサイトメトリー(FC)の定量化とKBTによって推定されたFMHを比較する。 方法:KBT後のFCによる分析のために母体の血液を送信しました。抗ヘイモグロビンF(HBF)、抗Dおよび組み合わせた抗HBF/抗炭酸脱水酵素(CA)を含むさまざまな試薬を使用しました。 結果:妊娠後期に胎児死または重度の新生児貧血を引き起こす大規模なFMH(> 100 mLの胎児細胞)の8例がFCによって確認されました。抗HBF FCは、母体F細胞と胎児細胞を特定しました。場合によっては、これらの赤血球集団は合併しましたが、F細胞のみに標識する抗CAによって区別される可能性があります。KBTを使用して、12人の患者に対して偽陽性のFMH結果が得られました。12人の患者は、FCによって母体F細胞であることが示された細胞を強く染色しました。これらすべての患者はF細胞(総赤細胞の5%以上)が増加しましたが、FMHの患者の16%とドナーの22%のみがF細胞を上昇させていました。対照的に、抗D FCは、d胎児細胞が弱い1人を除く15人のd陰性患者すべてで、D陽性FMHを迅速かつ迅速で定量化しました。4つのサンプルの白血球は、抗Dをさまざまに結合し、誤って高いFMHを与えましたが、組み合わせた抗D/抗CD45を使用してFC分析から排除することができました。 結論:FCによる抗Dを使用したFMH定量は、母体サンプルの大部分に適しており、抗D予防の正確な標的投与を可能にする可能性があります。

背景:Kleihauer-Betkeテスト(KBT)による胎児の出血(FMH)評価は迅速ですが、半定量的であり、誤った肯定的な結果に対して責任を負います。 目的:大規模なFMH、産科リスク要因、または技術的な問題を抱える37人の患者のフローサイトメトリー(FC)の定量化とKBTによって推定されたFMHを比較する。 方法:KBT後のFCによる分析のために母体の血液を送信しました。抗ヘイモグロビンF(HBF)、抗Dおよび組み合わせた抗HBF/抗炭酸脱水酵素(CA)を含むさまざまな試薬を使用しました。 結果:妊娠後期に胎児死または重度の新生児貧血を引き起こす大規模なFMH(> 100 mLの胎児細胞)の8例がFCによって確認されました。抗HBF FCは、母体F細胞と胎児細胞を特定しました。場合によっては、これらの赤血球集団は合併しましたが、F細胞のみに標識する抗CAによって区別される可能性があります。KBTを使用して、12人の患者に対して偽陽性のFMH結果が得られました。12人の患者は、FCによって母体F細胞であることが示された細胞を強く染色しました。これらすべての患者はF細胞(総赤細胞の5%以上)が増加しましたが、FMHの患者の16%とドナーの22%のみがF細胞を上昇させていました。対照的に、抗D FCは、d胎児細胞が弱い1人を除く15人のd陰性患者すべてで、D陽性FMHを迅速かつ迅速で定量化しました。4つのサンプルの白血球は、抗Dをさまざまに結合し、誤って高いFMHを与えましたが、組み合わせた抗D/抗CD45を使用してFC分析から排除することができました。 結論:FCによる抗Dを使用したFMH定量は、母体サンプルの大部分に適しており、抗D予防の正確な標的投与を可能にする可能性があります。

BACKGROUND: Fetomaternal haemorrhage (FMH) assessment by the Kleihauer-Betke test (KBT) is rapid but semi-quantitative and liable to false positive results. OBJECTIVES: To compare FMH estimated by KBT with flow cytometry (FC) quantitation for 37 patients with massive FMH, obstetric risk factors or technical problems. METHODS: Maternal blood was sent for analysis by FC after KBT. A variety of reagents including anti-haemoglobin F (HbF), anti-D and combined anti-HbF/anti-carbonic anhydrase (CA) were used. RESULTS: Eight cases of massive FMH (>100 mL fetal cells) causing fetal death or severe neonatal anaemia in late gestation were confirmed by FC. Anti-HbF FC identified maternal F cells and fetal cells. In some cases these red cell populations merged but they could be differentiated by anti-CA, labelling F cells only. Using KBT, false positive FMH results were obtained for 12 patients, who had strongly stained cells that were then shown by FC to be maternal F cells. All these patients had increased F cells (>5% of total red cells) whereas only 16% of patients with FMH and 22% of donors had elevated F cells. In contrast, anti-D FC was simple and rapid, quantitating D-positive FMH in all 15 D-negative patients except one with massive FMH of weak D fetal cells. Leucocytes in four samples bound anti-D, variably, giving erroneously high FMH, but they could be eliminated from FC analysis using combined anti-D/anti-CD45. CONCLUSION: FMH quantitation using anti-D by FC is suitable for the majority of maternal samples and could enable accurate targeted dosing of anti-D prophylaxis.

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