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Analytica chimica acta2013May02Vol.775issue()

複雑な生物液からのホスホペプチド濃縮のための機能化されたダイヤモンドナノポーダー

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

ダイヤモンドは、生体分子に対する高い親和性と生体適合性で知られており、分離科学とライフサイエンスの研究でのみ使用されています。現在の研究では、ダイヤモンドナノポーダーは、ホスホペプチド濃縮のための固定化された金属イオンアフィニティクロマトグラフィー(IMAC)材料として、およびMaldi-TOF-MSを介した複雑な混合物およびヒト血清プロファイリングの脱塩用の逆相(C-18)培地として誘導体化されています。機能化されたダイヤモンドナノポーダーは、フーリエ変換赤外線(FT-IR)分光法、スキャン電子顕微鏡(SEM)、およびエネルギー分散型X線(EDX)分光法によって特徴付けられます。ダイヤモンド-IMACは、標準的なタンパク質(β-カセイン)、スパイクされたヒト血清、卵黄、およびホスホペプチド濃縮のために非脂肪乳に適用されます。結果は、Fe(3+)およびLa(3+)イオンで固定化された合成IMAC-Diamondの選択性を示しています。精巧な使用を理解するために、ダイヤモンドアイマックは、潜在的なバイオマーカーのために胆嚢癌の血清サンプルにも適用されます。データベース検索は、リン酸化部位の割り当てのためにマスコットプログラム(www.matrixscience.com)によって実行されます。したがって、ダイヤモンドナノポーダーは多機能使用を伴う分離媒体であり、診断とバイオマーカーの識別のためにがんタンパク質プロファイリングに適用できます。

ダイヤモンドは、生体分子に対する高い親和性と生体適合性で知られており、分離科学とライフサイエンスの研究でのみ使用されています。現在の研究では、ダイヤモンドナノポーダーは、ホスホペプチド濃縮のための固定化された金属イオンアフィニティクロマトグラフィー(IMAC)材料として、およびMaldi-TOF-MSを介した複雑な混合物およびヒト血清プロファイリングの脱塩用の逆相(C-18)培地として誘導体化されています。機能化されたダイヤモンドナノポーダーは、フーリエ変換赤外線(FT-IR)分光法、スキャン電子顕微鏡(SEM)、およびエネルギー分散型X線(EDX)分光法によって特徴付けられます。ダイヤモンド-IMACは、標準的なタンパク質(β-カセイン)、スパイクされたヒト血清、卵黄、およびホスホペプチド濃縮のために非脂肪乳に適用されます。結果は、Fe(3+)およびLa(3+)イオンで固定化された合成IMAC-Diamondの選択性を示しています。精巧な使用を理解するために、ダイヤモンドアイマックは、潜在的なバイオマーカーのために胆嚢癌の血清サンプルにも適用されます。データベース検索は、リン酸化部位の割り当てのためにマスコットプログラム(www.matrixscience.com)によって実行されます。したがって、ダイヤモンドナノポーダーは多機能使用を伴う分離媒体であり、診断とバイオマーカーの識別のためにがんタンパク質プロファイリングに適用できます。

Diamond is known for its high affinity and biocompatibility towards biomolecules and is used exclusively in separation sciences and life science research. In present study, diamond nanopowder is derivatized as Immobilized Metal Ion Affinity Chromatographic (IMAC) material for the phosphopeptides enrichment and as Reversed Phase (C-18) media for the desalting of complex mixtures and human serum profiling through MALDI-TOF-MS. Functionalized diamond nanopowder is characterized by Fourier transform infrared (FT-IR) spectroscopy, scanning electron microscopy (SEM) and energy dispersive X-ray (EDX) spectroscopy. Diamond-IMAC is applied to the standard protein (β-casein), spiked human serum, egg yolk and non-fat milk for the phosphopeptides enrichment. Results show the selectivity of synthesized IMAC-diamond immobilized with Fe(3+) and La(3+) ions. To comprehend the elaborated use, diamond-IMAC is also applied to the serum samples from gall bladder carcinoma for the potential biomarkers. Database search is carried out by the Mascot program (www.matrixscience.com) for the assignment of phosphorylation sites. Diamond nanopowder is thus a separation media with multifunctional use and can be applied to cancer protein profiling for the diagnosis and biomarker identification.

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