B型肝炎ウイルスエンベロープタンパク質を結合するキメラ抗原受容体を発現するT細胞は、マウスのウイルスの複製を制御します

背景と目的：抗ウイルス剤はB型肝炎ウイルス（HBV）の複製を抑制しますが、感染をクリアしません。HBVを根絶するには強力なエフェクターT細胞応答が必要ですが、これは慢性感染症の患者では発生しません。T細胞は、HBV特異的受容体を発現することによりウイルス感染細胞に向けられ、それによりHBVを透明にし、肝臓がんの発症を防ぐのに役立ちます。マウスでは、リダイレクトされたT細胞が養子移植後、以前のT細胞枯渇なしで生着できるかどうか、および大量の循環ウイルス抗原が移植されたT細胞を不活性化するか、制御されていない免疫媒介損傷を引き起こすかどうかを研究しました。 方法：CD8（+）T細胞をマウスから分離し、最適化されたプロトコルを使用して刺激しました。HBVエンベロープタンパク質（S-CAR）に結合し、T細胞を活性化するキメラ抗原受容体（CAR）は、レトロウイルスベクターを使用して細胞の表面に発現しました。マーカーCD45.1を運ぶS-CAR発現CD8（+）T細胞をCD45.2（+）HBVトランスジェニックマウスに注入しました。これらのマウスを、ワクチン接種によって誘導されたCD8（+）T細胞、適切なシグナル伝達ドメインのない車を発現する細胞、またはHBVタンパク質（コントロール）を結合しない車を発現する細胞を発現する細胞と比較しました。 結果：HBV特異的CARを発現したCD8（+）T細胞は、異なるHBVサブタイプを認識し、免疫能力のHBVトランスジェニックマウスを生着および拡張することができました。養子移入後、肝臓に局在して機能し、コントロールと比較してHBV複製を迅速かつ効率的に制御したS-CAR発現T細胞は、一時的な肝臓損傷のみを引き起こしました。大量の循環ウイルス抗原は、S-CARグラフトT細胞を損なうか過剰に活性化しませんでした。 結論：HBVエンベロープタンパク質に特有のCARを含むT細胞は、HBV複製を減らすためにマウスの肝臓に局在し、一時的な肝臓損傷のみを引き起こします。この免疫細胞療法は、HLA型に関係なく、慢性B型肝炎の患者に対して開発される可能性があります。

BACKGROUND & AIMS: Antiviral agents suppress hepatitis B virus (HBV) replication but do not clear the infection. A strong effector T-cell response is required to eradicate HBV, but this does not occur in patients with chronic infection. T cells might be directed toward virus-infected cells by expressing HBV-specific receptors and thereby clear HBV and help to prevent development of liver cancer. In mice, we studied whether redirected T cells can engraft after adoptive transfer, without prior T-cell depletion, and whether the large amounts of circulating viral antigens inactivate the transferred T cells or lead to uncontrolled immune-mediated damage. METHODS: CD8(+) T cells were isolated from mice and stimulated using an optimized protocol. Chimeric antigen receptors (CARs) that bind HBV envelope proteins (S-CAR) and activate T cells were expressed on the surface of cells using retroviral vectors. S-CAR-expressing CD8(+) T cells, which carried the marker CD45.1, were injected into CD45.2(+) HBV transgenic mice. We compared these mice with mice that received CD8(+) T cells induced by vaccination, cells that express a CAR without a proper signaling domain, or cells that express a CAR that does not bind HBV proteins (controls). RESULTS: CD8(+) T cells that expressed HBV-specific CARs recognized different HBV subtypes and were able to engraft and expand in immune-competent HBV transgenic mice. After adoptive transfer, the S-CAR-expressing T cells localized to and functioned in the liver and rapidly and efficiently controlled HBV replication compared with controls, causing only transient liver damage. The large amount of circulating viral antigen did not impair or overactivate the S-CAR-grafted T cells. CONCLUSIONS: T cells with a CAR specific for HBV envelope proteins localize to the liver in mice to reduce HBV replication, causing only transient liver damage. This immune cell therapy might be developed for patients with chronic hepatitis B, regardless of their HLA type.