Equolは、MCF-7乳癌細胞におけるカスパーゼ媒介アポトーシスの誘導により、タモキシフェンの抗腫瘍活性を高める

背景：ダイゼインやその代謝産物等等などの大豆の植物性エストロゲンは、アジアの女性の乳がんの低い発生率の原因であることが提案されています。エストロゲン受容体陽性乳がん患者の大部分はタモキシフェンで治療されているため、この研究の基本的な目的は、エクールがタモキシフェンの抗腫瘍効果を高めるかどうかを判断し、関連する分子メカニズムを特定することです。 方法：この目的のために、生存率アッセイ、アネキシン-V/PI染色、細胞周期、およびウエスタンブロット分析を使用して、エストロゲン依存性MCF-7乳癌細胞に対するエクオールとタモキシフェンの個々の効果を調べました。 結果：equol（>50μm）および4-ヒドロキシタモキシフェン（4-OHT;> 100 nm）がMCF-7細胞の生存率を大幅に低下させることがわかりました。さらに、エクオール（100μM）と4-OHT（10μM）の組み合わせは、各化合物だけよりも効果的にアポトーシスを誘導しました。PARP-OHTを介したアポトーシスを阻害したPARPおよびα-フォドリン切断を伴う、PAN-カスパーゼ阻害剤Z-VAD-FMKによるMCF-7細胞のその後の処理は、アポトーシスが主にカスパーゼ媒介であることを示しています。これらの化合物はまた、カスパーゼ-9およびカスパーゼ-7の活性化とサイトゾルへのシトクロムC放出を伴うBcl-2：Bax比の著しい減少を誘導しました。まとめると、これらのデータは、等ョールとタモキシフェンの組み合わせが各化合物だけよりも効率的に固有のアポトーシス経路を活性化するという概念をサポートしています。 結論：その結果、エストロゲン応答性の乳癌に対する追加の保護を提供することにより、タモキシフェンの効果を高めるために、併用治療と臨床研究でエクオールを治療的に使用することができます。

BACKGROUND: Soy phytoestrogens, such as daidzein and its metabolite equol, have been proposed to be responsible for the low breast cancer rate in Asian women. Since the majority of estrogen receptor positive breast cancer patients are treated with tamoxifen, the basic objective of this study is to determine whether equol enhances tamoxifen's anti-tumor effect, and to identify the molecular mechanisms involved. METHODS: For this purpose, we examined the individual and combined effects of equol and tamoxifen on the estrogen-dependent MCF-7 breast cancer cells using viability assays, annexin-V/PI staining, cell cycle and western blot analysis. RESULTS: We found that equol (>50 μM) and 4-hydroxy-tamoxifen (4-OHT; >100 nM) significantly reduced the MCF-7 cell viability. Furthermore, the combination of equol (100 μM) and 4-OHT (10 μM) induced apoptosis more effectively than each compound alone. Subsequent treatment of MCF-7 cells with the pan-caspase inhibitor Z-VAD-FMK inhibited equol- and 4-OHT-mediated apoptosis, which was accompanied by PARP and α-fodrin cleavage, indicating that apoptosis is mainly caspase-mediated. These compounds also induced a marked reduction in the bcl-2:bax ratio, which was accompanied by caspase-9 and caspase-7 activation and cytochrome-c release to the cytosol. Taken together, these data support the notion that the combination of equol and tamoxifen activates the intrinsic apoptotic pathway more efficiently than each compound alone. CONCLUSIONS: Consequently, equol may be used therapeutically in combination treatments and clinical studies to enhance tamoxifen's effect by providing additional protection against estrogen-responsive breast cancers.