脂肪細胞分化中に調節される主要なペリピンであるPlin2は、in vitroでの皮脂脂質蓄積とin vivoでの皮脂腺サイズを制御します

背景：脂質合成と貯蔵は、脂質液滴（LDS）によって達成されます。5人のメンバー（Plin1-Plin5）で構成されるLD関連タンパク質のペリピンファミリーは、脂肪細胞ではよく特徴付けられていますが、LD形成が細胞分化の重要な特徴である上皮細胞ではありません。 方法：皮脂腺細胞株SZ95およびヒト皮脂腺でのペリピン発現は、QRT-PCR、ウエスタンブロット、および免疫組織化学によって研究されました。脂質の蓄積は、ナイル赤染色と質量分析によって評価されました。 結果：Plin2とPlin3は、未分化脂肪細胞の中で最も豊富なペリピンです。リノール酸（LA）による脂質発生の誘導により、Plin3を除くすべてのペリリピンの転写レベルが増加し、Plin2タンパク質の時間依存性増加をもたらしました。ナイルレッド染色は、PLIN2のsiRNAを介したダウンレギュレーションが基底およびLA誘発性の脂質蓄積を著しく損なうことを明らかにしました。質量分析により、PLIN2欠乏症は、基底条件下でのセボシテス中のジ - トリアシル - グリセロールエステル、ホスファチジルコリン脂質、セラミドなど、いくつかの特定の脂質画分の量の減少を引き起こすことが明らかになりました。対照的に、Plin2のダウンレギュレーションは、特定のLA誘導トリグリセリドの蓄積にのみ統計的に有意な阻害効果を発揮しました。Plin2欠損マウスは、皮脂腺の正常な形態を示しました。しかし、それらの皮脂腺のサイズは大幅に減少し、細胞の増殖が少ないことを示しました。 結論：Plin2は、in vitroでの脂肪細胞分化中に調節される主要なペリピンです。Plin2は、in vitroでの皮脂脂質蓄積にとっても重要であり、in vivoで皮脂腺サイズを調節します。 一般的な重要性：我々の研究は、セボシテスにおけるLD関連タンパク質の最初の系統的分析を提供します。

BACKGROUND: Lipid synthesis and storage are accomplished by lipid droplets (LDs). The perilipin family of LD-associated proteins, comprising 5 members (PLIN1-PLIN5), has been well characterized in adipocytes but not in sebocytes, epithelial cells in which LD formation is a key feature of the cellular differentiation. METHODS: Perilipin expression in the sebaceous gland cell line SZ95 and in human sebaceous glands was studied by qRT-PCR, Western blots, and immunohistochemistry. Lipid accumulation was evaluated by Nile red staining and mass spectrometry. RESULTS: PLIN2 and PLIN3 are the most abundant perilipins in undifferentiated sebocytes. Induction of lipogenesis by linoleic acid (LA) resulted in increased transcript levels of all perilipins except for PLIN3 and in a time-dependent increase of PLIN2 protein. Nile red staining revealed that siRNA-mediated downregulation of PLIN2 significantly impaired basal and LA-induced lipid accumulation. Mass spectrometry revealed PLIN2 deficiency to cause a reduction in the amount of several specific lipid fractions, including di- and triacyl-glycerol esters, phosphatidylcholine lipids, and ceramides in sebocytes under basal conditions. In contrast, PLIN2 downregulation exerted a statistically significant inhibitory effect only on the accumulation of specific LA-induced triglycerides. PLIN2-deficient mice showed normal morphology of sebaceous glands. However, their sebaceous glands were significantly reduced in size and showed less cell proliferation. CONCLUSIONS: PLIN2 is the major perilipin regulated during sebocyte differentiation in vitro. PLIN2 is also important for sebaceous lipid accumulation in vitro and regulates sebaceous gland size in vivo. GENERAL SIGNIFICANCE: Our study provides the first systematic analysis of LD-associated proteins in sebocytes.